晚上12点,远近略闻爆竹声; 夜里3点半,有早起的鸟儿啾啾两下; 清晨4点半,天色就已微微发亮; 国自然基金还有三周时间就要提交了,想必很多人近期都有这样的见闻。 春节长假无法休息,更不提假后第一个周末了。 中午,毒小妹发来两条贺电,第一条是:梦熊好帅;第二条是:我想研究一个分子,快帮我找一个下游调控的miRNA开题用,急。 想必列位看官心中已然明了:这也太简单了吧。 毒小妹的研究方向是卵巢癌(OV)的发病机理,她选择的分子是大名鼎鼎的GAS5。 好吧,直接一波生信数据库走起。 1、查看GAS5的表达,发现在肿瘤组织中低表达 2、查看GAS5在OV中的报道 A、Decreased expression of long non-coding RNA GAS5promotes cell proliferation, migration and invasion, and indicates a poorprognosis in ovarian cancer. B、LncRNA GAS5 suppresses ovarian cancer by inducinginflammasome formation. C、Long non-coding RNA growth arrest-specifictranscript 5 is involved in ovarian cancer cell apoptosis through themitochondria-mediated apoptosis pathway. Pubmed中一共搜到了三篇GAS5在OV中的报道,这说明GAS5在OV中的研究可以算一个创新点。 3、下游思路 ceRNA在基础研究中经久不衰,它代表了一种全新的基因表达调控模式。其调控网络涉及多种RNA分子,包括mRNA、假基因、lncRNA、circRNA和miRNA等,用它来设计一个简单课题完全OK。毒小妹仅仅需要GAS5作用的miRNA,能做出来的可能性高即可。 a、先用我们熟悉的StarBase进行预测: 有很多miRNAs预测到与GAS5结合 而这么多miRNAs该选哪个呢?一般情况下可以使用两头往中间靠的策略,而这里毒小妹仅仅想找一个证据稍微强一些的miRNA。 b、接下来,我们使用DIANA tools进行预测。 先在UCSC中找到GAS5的位置:chr1:173,833,039-173,837,125,用Search by location进行查询: 又获得了大量的miRNAs,复制下来,去重。 c、为了继续减少候选miRNAs数据,确定最终选择的miRNA,梦熊又利用lncRNAMAP进行预测: 该工具以示意图的方式表示着miRNA在哪个位置与lncRNA存在结合位点。 注:这个工具需要将miRNA一个一个复制下,看上去不费脑子的事儿也挺令人讨厌的,不过为了课题豁出去了。 终于,梦熊又获得了一批miRNAs: d、利用venn图取交集 惊人的事发生了,三个数据库中均包含了一个共同的miRNA,miR-18a-5p: e、查看miR-18a-5p在卵巢癌中的报道 Pubmed搜索发现,仅有一些关于miR-18a与卵巢癌基础研究,而无明确的miR-18a-5p在结直肠癌中的报道。另外miR-18a-5p在其他肿瘤中起着促癌作用,跟本思路一致。 那么最终我们可以选定miR-18a-5p作为本项目中另一研究分子。 而miR-18a-5p下游分子又该如何选择呢?敬等毒小妹的下回贺电。 本思路仅为学术讨论,如有雷同,纯属巧合。 关注后获取《科研修炼手册》1、2、3、4、5、6,基金篇精华合集 |
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