|
责编丨迦溆 辅助生殖与体细胞核移植过程中的表观遗传障碍。图片引自：Matoba, S., & Zhang, Y. (2018). Somatic Cell Nuclear Transfer Reprogramming: Mechanisms and Applications. Cell stem cell. 体细胞核移植（somatic cell nuclear transfer, SCNT）是指将供体细胞核经显微操作移入去核的卵母细胞中，组成重构胚胎并使之发育成新个体的技术。在过去的几十年时间里，虽然这项技术在多种动物上获得成功，但核移植胚胎和正常受精胚胎相比，发育率仍然极低。以小鼠为例，克隆动物的出生率只有1%左右；此外，克隆胚胎也往往存在着胎儿及胎盘的多种发育异常。此前，研究人员陆续揭示了导致克隆效率低下的多种表观遗传障碍及解决办法（张毅组发现体细胞核移植中新的表观遗传障碍；张毅组揭示核移植重编程过程中的重要调控规律），这些研究成果促成了灵长类动物体细胞克隆的成功。然而，克隆胚胎中DNA甲基化的重编程过程及其对克隆效率的影响在很大程度上还是未知的。 8月23日，同济大学生命科学与技术学院、同济大学附属第一妇婴保健院转化医学中心高绍荣教授团队与张勇教授课题组合作在Cell Stem Cell在线发表题为Inhibition of aberrant DNA re-methylation improves post-implantation development of somatic cell nuclear transfer embryos的文章。该研究通过对不同发育命运体细胞克隆胚胎进行全基因组DNA甲基化组高通量测序分析，详细地研究了小鼠克隆胚胎着床前发育过程中DNA甲基化修饰的重编程过程，并揭示了异常的DNA再甲基化（DNA re-methylation）是导致克隆胚胎着床后发育异常的关键障碍。这是实验室继2016年在Cell Discovery发表论文揭示组蛋白修饰异常导致体细胞核移植效率低下后的又一重要发现【1】。 在这项研究中，研究人员利用微量细胞全基因组亚硫酸氢盐测序（WGBS）技术，首次绘制了不同发育命运的克隆胚胎植入前发育过程中的全基因组DNA甲基化组图谱。研究发现克隆胚胎早期发育过程中CpG位点的DNA甲基化动态变化存在着再甲基化现象，特别是4-细胞时期较为明显。通过对比不同发育命运克隆胚胎与正常受精胚胎在同一发育时期的DNA甲基化差异，研究人员在早期着床前发育各个时期鉴定出了广泛的再甲基化位点（rDMR），并且这一再甲基化现象在发育阻滞的克隆胚胎中更为明显。通过分别以多种终末分化细胞作为供体细胞，研究人员还发现这一再甲基化过程在克隆胚胎发育中是一个广泛存在并且具有供核细胞特异性的机制。结合转录组数据，进一步的分析发现这一再甲基化过程是导致克隆胚胎中合子基因和部分逆转座子不完全激活的关键因素。 更重要的是，通过干扰DNA甲基转移酶的表达可以有效降低克隆胚胎中异常的DNA再甲基化水平，重新激活克隆胚胎的特定转录本，并改进克隆胚胎的体内外发育效率。值得一提的是，由此获得的克隆动物，其胎盘发育也得到了明显的改善，这是以往针对多种表观遗传障碍的解决办法都没有做到的，为研究着床后克隆胚胎的异常发育提供了新的思路。 最后，研究人员发现克隆胚胎的异常DNA再甲基化和组蛋白修饰重编程缺陷是两个相对独立的壁垒。同时采取敲降DNA甲基转移酶与过表达组蛋白去甲基化酶两种措施，可以使克隆成功率提高到17%左右。 综上所述，这项研究发现遗传自供核细胞的DNA再甲基化记忆是体细胞核移植胚胎发育的重要表观遗传障碍，而打破克隆胚胎中的多种表观重编程壁垒能极大提高克隆效率。此外，DNA再甲基化影响克隆胚胎着床后胚外组织发育的相关详细机理值得进一步详细研究。 据悉，同济大学高绍荣教授实验室的高睿博士、张勇教授实验室的王晨飞博士及高亚威副教授为本文的共同第一作者。高绍荣教授、张勇教授及刘文强副研究员为本文的共同通讯作者。 |
|
|
