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使用CRISPR的新方法——thgRNA

 生物_医药_科研 2018-12-20

CRISPR基因编辑在医学、农业等诸多领域越来越流行,它被称为“本世纪最大的科学神话之一”。 CRISPR允许科学家精确地定位和编辑活细胞内DNA,帮助纠正导致遗传疾病的异常,中国已经率先开始进行人体临床试验了。


然而,始终有一个问题困扰着科学家们,如何在整合来自他们正在研究的细胞内信息的同时,编程CRISPR系统以靶向DNA。


在特拉华大学,化学工程教授Wilfred Chen和他的研究生Ka-Hei Siu设计了靶向大肠杆菌基因调控的新结构——绰号为“小立足点门控gRNA(toehold-gated gRNA,thgRNA)”。


传统上,CRISPR/Cas9基因组编辑使用单链核糖核酸(RNA)引导Cas9酶到达靶向脱氧核糖核酸(DNA)。Chen和Siu设计一个发卡结构,阻止部分RNA识别DNA,只暴露一小部分(被称为小立足点)允许与其他RNA结合,然后,利用细胞内的RNA作为触发器,打开阻断阀门,激活Cas9蛋白,以便它能结合和调节DNA。


关键是我们想使用一些细胞本我信息,”Chen说。“我们希望利用细胞天然应答作为CRISPR/Cas9蛋白功能的一种调节方式,使其基本上发展为一种受控的机制,以便我们能够相应地调节细胞功能。”


这项技术提供了一种多功能的“即插即用”设计,可用于在各种系统中诱导基因编辑和调节。


“向前看,这个想法是可行的。理论上讲,任何类型的细胞信使RNA都可以作为激活或失活装置,”他说。“你可以想象,将来我们能根据葡萄糖依赖或缺乏磷酸盐或暴露在高温/低温/低pH值等条件,激活某些东西。”

原文检索:

Riboregulated toehold-gated gRNA for programmable CRISPR–Cas9 function

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