二甲双胍作为一种胰岛素增敏剂,广泛应用于2型糖尿病的治疗。近年来,有关二甲双胍对银屑病治疗作用的研究日益增多。宋翠豪等研究了二甲双胍对角质形成细胞增殖、分化、炎症因子分泌等的影响,并探讨其机制,为二甲双胍应用于银屑病的治疗提供依据。 二甲双胍对HaCaT细胞增殖分化和炎症因子分泌的影响 宋翠豪1 王睿1 陈双景2 郑力强1 赵梓纲1 杨京润1 李承新1 作者单位:1解放军总医院皮肤科,北京 100853;2军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所 放射生物学研究室,北京 100850 采用1、2、5、10、20、50 mmol/L二甲双胍分别作用于HaCaT细胞24、48、72 h,CCK8法检测二甲双胍对HaCaT细胞存活率的影响。流式细胞仪检测0(对照组)、0.5、1、2、5、10 mmol/L二甲双胍对培养48 h的HaCaT细胞周期和凋亡的影响,Western印迹法检测HaCaT细胞增殖和分化相关蛋白角蛋白16、角蛋白17、角蛋白1、内披蛋白,凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及AKT/mTOR/STAT3通路蛋白表达水平的影响,ELISA检测HaCaT细胞炎症因子白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-23分泌水平。 倒置显微镜下观察不同浓度二甲双胍干预48 h对HaCaT细胞形态的影响(图中标尺 = 50 μm) 二甲双胍干预后,细胞形态变得不规则,细胞间粘附性变差,连接不紧密,细胞数量减少,培养液中细胞碎片增多,细胞形态改变随药物浓度增加更加明显 结果显示,二甲双胍对HaCaT细胞增殖有抑制作用,且随着二甲双胍浓度的增加,细胞存活率逐渐降低。0、0.5、1、2、5、10 mmol/L二甲双胍干预HaCaT细胞48 h后,G2/M期细胞比例逐渐增加,早期细胞凋亡率逐渐升高;随二甲双胍浓度增加,细胞增殖分化角蛋白1、促凋亡蛋白Bax蛋白表达呈上升趋势,细胞凋亡相关角蛋白16、角蛋白17、凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达呈下降趋势。不同浓度二甲双胍干预48 h后,HaCaT细胞IL-8、TNF-α表达水平明显下降,但IL-23表达无明显变化。 0、0.5、1、2、5、10 mmol/L二甲双胍干预HaCaT细胞48 h后,随二甲双胍浓度增加,p-AKT、p-mTOR、p-STAT3表达水平逐渐下降,而AKT、mTOR、STAT3蛋白表达差异无统计学意义。 不同浓度二甲双胍干预48 h后对HaCaT细胞分泌白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-23水平的影响 a:P <>b:P > 0.05 因此,二甲双胍可能通过调控AKT/mTOR/STAT3信号通路抑制HaCaT细胞增殖,促进HaCaT细胞分化,促进细胞凋亡及抑制炎症因子分泌。 |
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