桑椹抗氧化活性的初步研究的论文
【摘要】目的：桑椹是既是食用又是药用的水果之一，具有很高的营养价值，本文对它所含的抗氧化活性成分进行了研究。方法：新鲜桑椹的甲醇提取物用乙酸乙酯萃取后，通过硅胶柱层析、薄层层析等进行分离，得到的馏分用dpph法测定其抗氧化活性。 结果：经过两次分离，各得到12个和7个馏分，大部分的馏分显示出了很强的抗氧化活性。 结论：日常食用的药食两用水果桑椹中含有抗氧化活性成分，可以通过日常饮食的摄入达到抗氧化的目的。
【关键词】桑椹；抗氧化活性；dpph法
【abstract】 objective mulberry is one of both edible and medicinal fruits ethod the fresh mulberry ethanol, and after concentration under reduced pressure, the aqueous residue n and thin layer chromatography, gained fractions easure the antioxidative activity by dpph method. result 12 fractions and 7 fractions ost of the fractions shoulberry, and antioxidation can be achieved by intake of mulberry.
【key ulberry; antioxidative activity; dpph method
桑椹，又名桑果、桑子，味甘、性寒，具有生津止渴、滋阴补血、补肝益肾、固精安胎、乌须黑发、聪耳明目、安神养心、润肠通便、健步履、利关节、去风湿、解酒等功效，常用于医治糖尿病、肝肾阴虚、失眠耳鸣、津液不足、风湿、便秘、须发早白、神经衰弱［1］等。.现代医学研究发现，桑椹还具有防癌抗诱变、增强免疫力、驻颜抗衰老、促进造血细胞生长、降低血糖血脂［2］等方面的保健功能。本研究旨在通过提取桑椹鲜果中的抗氧化活性物质，利用dpph法测定各馏分的抗氧化活性。
1 材料与方法
1.1 材料。 作为实验材料的桑椹为济南近郊所产的水果，从济南市果品批发市场购得。
1.2 仪器。 sb-1000型旋转蒸发仪：上海爱明仪器有限公司；uv754紫外可见分光光度计、fa2004b型电子天平：上海精密科学仪器有限公司；shb—ⅲ循环水式多用真空水泵：郑州长城科工贸有限公司；zf7c三用紫外分析仪：上海康华生化仪器制造有限公司。
1.3试剂。 dpph(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)：alfa aesar公司；无水乙醇、硫酸：莱阳市康德化工有限公司；甲醇、正己烷：天津市广成化学试剂有限公司；三氯甲烷：天津市北方天医化学试剂厂；乙酸乙酯：天津市富宇精细化工有限公司；正丁醇、冰乙酸：天津市化学试剂三厂；硅胶：青岛海浪硅胶干燥剂厂；试剂均为分析纯。
1.4 方法
1.4.1桑椹活性成分的提取。 将10千克新鲜的紫红色桑椹放入容器中，加入10升甲醇溶液，室温下避光放置两天。用过滤瓶和砂芯漏斗抽滤后得到桑椹的初提液，暂放在棕色玻璃瓶中冷藏保存。再次将10升甲醇溶液加入盛有桑椹的容器中，放置一天，进行第二次提取。将两次的提取液混合，用旋转蒸发仪进行减压浓缩，得到桑椹的甲醇粗提水溶液。
将桑椹的甲醇粗提水溶液用乙酸乙酯萃取，得到190克桑椹乙酸乙酯提取物，将其溶解在50毫升的乙酸乙酯中，放入棕色瓶中在冰箱中保存待用。
1.4.2玻璃柱层析法分离桑椹活性成分。 其中一部分的乙酸乙酯提取物（2.5g）经过硅胶色谱柱（40×2cm i.d.），用正己烷-乙酸乙酯-甲醇溶液按比例洗提，溶出12馏分。50%和100%甲醇馏分（0.5g）又进一步经过硅胶色谱柱（30×1.5 cm i.d.），用三氯甲烷-甲醇溶液洗提，得到7馏分。
1.4.3 薄层层析法（thin layer chromatography，tlc）分离桑椹活性成分。 将各馏分用毛细管均匀地点在薄层层析板上，放入展开槽中进行分离。待分离完毕后，用含5%硫酸的乙醇溶液喷雾后加热，并计算分离成分的rf值。
1.4.4抗氧化活性的测定（dpph法）。 dpph·是一种人工合成的稳定自由基，在无水乙醇中呈紫色，于517nm处有强吸收。当有自由基清除剂存在时，dpph·浓度减小而使其颜色减退，褪色程度与清除剂的能力及数量呈一定的关系。因而可用分光光度法进行定量测定、分析，从而评价所研究的物质的抗氧化活性的能力［3］。
准确称取0.0992克dpph，用无水乙醇定溶于100毫升的容量瓶
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