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关于用Image J量化westernblot条带灰度值，很多小伙伴们一直不确定到底怎么做才是正确的测量灰度方法，今天我们一起学习下。 Image J软件：Windows 版本软件安装 1. 下载地址： http://rsb.info./ij/download.html 2. 下载windows 32位带Java版本，双击软件安装。 一、灰度分析步骤 1、下图为样板图片： 2、 导入图片：File> Open> Sample1.jpg 图片导入后，Sample1.jpg在新的窗口中打开 3、图片类型设置：Image> Type> 8 bit 4、去除图片背景：Process> Subtract Background> … Subtract Background 窗口：Rolling ball radius 设为50 pixels，勾选light background，可选preview，点击“OK”确定。 5、 工具栏：选择“矩形选框” 6、最大化“Sample1.jpg”窗口，便于矩形选择，矩形选择第一个泳道。 7、 标记“矩形选框”为1：矩形选择后，调整矩形至合适大小，按下数字键“1”，或者Analyze> Gels> Select Fist Lane。 8、选择“泳道2”：拖动“1”的矩形框，会出现两个矩形选框，拖动矩形框至泳道2，调整位置，并按下数字键“2”，Image J 会自动调整大小使“矩形框2”与“矩形框1”保持同一水平。 9、 继续拖动，会出项新的“矩形选框”，调增至泳道3，并按下数字键“2”（注意：是按下数字键“2”），重复9至6个泳道全部选择。
10、 所有泳道选择后，按下数字键“3”，出现分析图谱。
11、“直线”封闭峰：工具栏选择“直线”，从起峰处至落峰处。
12、 计算峰值：工具栏> Wand(tracing) tool,点下刚才封闭的区域，峰值结果出现在新的窗口中。
计算结果：
13、其他泳道的操作方式，以此类推。 |
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