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万万没想到！ 外泌体 研究方案的正确打开方式！  啥是外泌体？ 外泌体（Exosome）是一种由活细胞分泌的圆形（dish）或杯状（cup）脂质双分子层膜微小囊泡，直径约30-100nm，可由各种类型的细胞分泌，广泛存在于血液、尿液、唾液、滑膜液、乳汁、脑脊液、眼泪、腹水、羊水等各种体液以及细胞培养上清中。外泌体是一种活性复合体，包含复杂的蛋白质，核酸和脂质。 最常见的外泌体蛋白组成包括膜转运和融合相关蛋白、多囊泡胞内体产生相关蛋白，（Alix, TSG101等）、分子伴侣（HSP70,HSP90）、整合素和四跨膜蛋白超家族（CD63,CD9,CD81, CD82等），这些成分反映了其生物起源。外泌体还富含胆固醇、鞘脂、神经酰胺、糖脂GM3和含长饱和脂肪酰基的甘油磷脂链。  外泌体的起源 外泌体的前身含有一个秘密武器，叫泛素化蛋白，被ESCRT（转运必需内体分选复合物）识别，形成内腔囊泡（ILVs），进一步形成膜性囊泡（MVBs），其中一部分会被降解为溶酶体，当MVBs与细胞膜发生融合后这些小囊泡可被释放到细胞外空间，称为外泌体。 外泌体生物功能 2013年，美国科学家James E. Rothman, Randy W. Schekman和德国科学家Thomas C. Sudhof因细胞囊泡运输的调节机制而荣获当年诺贝尔生理学或医学奖。 研究表明：外泌体有携带与运输功能，随着体液循环到达全身各个部位，通过与受体细胞的质膜保持稳定结合或经由内吞途径被内化，释放出外泌体中的内容物。外泌体与靶细胞融合后，靶细胞的生物学特性可以在基因水平（外泌体RNA）转录水平（外泌体miRNA）或在蛋白水平发生改变，从而实现细胞间通信。这些相互作用可能导致有益（如增强免疫状态）或有害（如扩散发病）的结果。 外泌体分离纯化方法  外泌体鉴定方法 NTA鉴定 纳米颗粒跟踪分析（Nanopraticle Tracking Analysis, NTA）技术可以对10-2000nm范围内的纳米颗粒进行快速实时动态检测，测量参数包括颗粒粒径、散射光强、浓度等，可对外泌体进行粒径大小及数量进行统计并做出初步质量评估。NTA鉴定基于NanoSight仪器平台，平台易用、快速、稳健、准确。  电镜鉴定 通过负染的方法，在电镜下直接观察单个外泌体的形态结构与大小，如下图。该鉴定基于透射电镜平台，仪器需要专业的技术人员进行操作。 外泌体研究案例分析 外泌体来源广泛，可从不用类型的样本中提取外泌体。通用型的外泌体研究方法见下图。  外泌体介导的miRNA调控肝癌发生的作用机制-技术路线   众里寻他千百度， 拓普为您专业解忧-外泌体研究！ 拓普生物为您提供外泌体相关研究的一体化科研技术服务和针对不同样本类型的专用外泌体提取试剂盒、外泌体核酸试剂盒等科研用试剂，欢迎广大科研伙伴前来订购和洽谈。 拓普生物 让科研成为一种乐趣 |
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