![]() diewisch历史唯物主义者昨天 14:25
CRISPR-Cas9是一种多功能的rna引导的基因组编辑工具。 在这里,我们证明了在CRISPR RNA (crRNA)中用DNA核苷酸部分替换RNA核苷酸可以在人类细胞中实现有效的基因编辑。当同时使用crRNA和sgRNA以及多个引导序列时,这种部分DNA替换策略可以保持目标活性。部分DNA置换也适用于另一个CRISPR系统Cpf1的crRNA。 我们发现,通过对离靶点裂解的聚焦分析、错配耐受性的测量以及对离靶点的全基因组谱分析,引导序列中的部分DNA置换显著减少了离靶点基因组的编辑。以Cas9-sgRNA复合物的结构为指导,crRNA的3 '端大部分可以被DNA核苷酸取代,而5 '和3 ' -DNA取代的crRNA可以实现高效的基因组编辑。 Cas9在DNA-RNA嵌合体的引导下,可以提供一种通用的策略来降低人类细胞和非目标基因组编辑的成本。 |
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