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Image J实用技巧: Western Blot偏斜条带如何拉直

 最后的大肠杆菌 2019-07-10
蛋白质印迹法(Western Blot)是目前蛋白质分析的一种常规方法。每一个研究生进行蛋白质分析、检测的首选。而我们在做WB的实验时,结果中的条带会出现各种稀奇古怪的现象。比如WB条带常见问题之一是带型异常:
带型异常条带拖尾,样品溶解不好
条带呈微笑状,凝胶不均匀冷却,中间冷却不好
纵向条纹,样品中含有不溶解性颗粒
条带偏斜,电极不平衡或者加样位置偏斜暗片白条带,-抗或二抗加入过多,适当稀释
条带两边扩散,样本中盐离子浓度过高

当出现弯曲的条带时应如何使用ImageJ进行调整呢?

拉直WB偏斜条带

下图是一个典型的带型偏斜的条带:

带型偏斜的条带

步骤:

  1. Image J软件打开上述图片,选择下图红框所示Segmented line沿着倾斜条带画间断线段:

选择红框所示Segmented line沿着倾斜条带画间断线段

  1. 鼠标双击Segmented line选项,设置线段的宽度至包含所有条带:

鼠标双击Segmented line选项

  1. 点击菜单栏Edit,Selection,Straighten,倾斜的WB条带即可拉直:

点击菜单栏Edit,Selection,Straighten,倾斜的WB条带即可拉直

该功能的其他示例,如将弯曲的尼罗河拉直:

将弯曲的尼罗河拉直

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