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[注]点击“标题”可查看原文 IHC/ICC是相对简单和直接的实验方法。然而，每个IHC/ICC实验都有多个需要优化的变量。最主要的挑战是针对不同抗原，如何优化实验条件，以产生特异性高且信号强的实验结果。本篇微信列出了影响IHC/ICC的变量和因素，旨在有助于IHC/ICC实验的设计、优化及疑难的解答。 组织和细胞样品必须经正确地收集和处理之后才能用于IHC/ICC研究。在多数情况下，通过单个实验变量可以确定最合适的样品准备法。想知道你的样本适用于何种收集和处理方法就来看看这篇吧~ IHC和ICC实验中所有样品都必须固定，以保护组织形态和目标分子的抗原性。固定会改变组织的化学组成，在保护组织结构和维持抗原表位之间常常需要进行权衡。细胞或组织固定不充分给蛋白在组织内快速降解留下了机会，会影响特异性的免疫反应。然而，过度固定会遮蔽抗原表位或导致很强的非特异性的背景染色，掩盖特异性染色。都有哪些因素会影响固定的程度呢？答案都在这里... 用合适的方法准备和固定组织和细胞样品之后，就可以进行染色了。如何避免非特异性染色？相信这个问题一定让不少人困惑头疼吧，那就来看看这篇微信吧！ 实验的每一小步，都是决定结果的一大步。在设计IHC/ICC实验时，一抗的选择是最重要的因素，而一抗的关键特征是抗原表位的特异性。本期为大家讲解的是IHC/ICC实验中一抗的选择和优化！ 与一抗孵育之后，可利用适当的检测系统来观察抗体结合。检测方法可以是直接的，也可以是间接的，产生荧光或显色信号。本期为大家讲解IHC/ICC实验中检测和显像的方法。 适当的对照对于IHC/ICC结果的准确阐释至关重要。令人满意的IHC/ICC实验设计产生的结果能够证明抗原位于正确的组织、细胞类型或亚细胞定位。固定、封闭、抗体孵育和抗原修复步骤的优化将产生强烈而特异的信号。因此，IHC/ICC实验必须包含阳性和阴性对照，以支持染色的有效性，并识别实验假象。本篇微信中，我们介绍了一些公认的对照，可用来证实您IHC/ICC结果的特异性。 尽管固定对于组织形态的保留是必不可少的，但这一过程对IHC/ICC检测也有不良影响。固定可能改变蛋白的生化特性，如目的表位被掩盖不再与一抗结合。表位的掩盖可能是由表位内氨基酸的交联、表位或附近位点与无关肽段的交联、表位构象的改变或抗原静电荷的改变引起的。抗原修复则是任何可以逆转表位掩盖和恢复表位-抗体结合的技术。  中源生物是Bio-Techne公司旗下 R&D Systems、Novus、Tocris品牌的一级代理商 如有相关问题请拨打免费服务电话咨询 400-8100-881 如您对我们的服务有任何的意见和建议请发至如下邮箱 service@sinozhongyuan.com
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