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前几天，有学生问我，“老师关于课本中的脂肪的检测观察实验有两种方案，其中方案一是向花生子叶制作的组织样液里滴加苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ来检测和观察，但是苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ本来就是有颜色是不是有颜色干扰，如果苏丹Ⅲ和苏丹Ⅳ本身颜色就是橘黄色和红色，那我怎么判断脂肪被染色了呢？”其实关于这个知识点，以前教书都是一笔带过，平时练习考试中也没有出现过这种类型的考题，也就没有真正的去探讨这个问题。学生的刁钻问题就不得不让我更深入地去了解加苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ两种染料了，下面分享我从网络上整理的加苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ相关知识。  1、苏丹III是一种化学染色剂，红棕色粉末；生物染色剂，如脂肪及其类似物质染色。主要是用于石油、机油和其他的一些工业溶剂中，目的是使其增色，也用于鞋、地板等的增光；具有致癌性，对人体的肝肾器官具有明显的毒性作用。 2、苏丹Ⅳ为深褐色，苏丹Ⅳ可用于检验脂肪（脂肪被染成红色）。对脂肪的亲和力比苏丹III好。 从这里可以看出，两种染色剂本身的颜色和与脂肪染色后的颜色还是有区别的，所以可以利用制作的组织样液里滴加苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ来检测和观察。 3、苏丹Ⅲ和苏丹Ⅳ的配制方法： 苏丹红Ⅲ配制：取0.1g苏丹Ⅲ，溶解在20ml95%酒精中 。 苏丹Ⅳ溶液的配制 称取0.1 g苏丹Ⅳ干粉，溶于50 mL丙酮中，再加入体积分数为70%的酒精50 mL，充分混合后即可使用。 4、什么是浮色，为什么用酒精洗？ 因为苏丹Ⅲ本身有颜色，它碰到脂肪后，会变成橘黄色，与遇脂肪前的颜色不同，所以要检验组织中的脂肪，就必须要除掉那些未与脂肪接触的多余的苏丹三染液，以免对检验结果造成影响。这个浮色就是指那些没有与脂肪接触而变色的多余的苏丹三染液的颜色。苏丹三不溶于水，易溶于酒精， 所以要用酒精洗，才能把多余的苏丹三溶解并洗净。 5、为什么苏丹Ⅳ比苏丹III染色时间短？ 苏丹Ⅲ和苏丹Ⅳ染色时间不能太长，时间太长染色太深，反而影响观察。苏丹Ⅲ染色时间是三分钟，而苏丹Ⅳ染色时间是一分钟，本人网上没有查询到比较权威的解释，个人理解为苏丹Ⅳ对脂肪的亲和力比苏丹III好，鉴于染色不能时间过长，因此苏丹Ⅳ比苏丹III染色时间短。 推荐阅读：碱性染料偏碱性吗？碱性染料染色原理全解析 |
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