环介导等温扩增 (LAMP ) 依赖核酸序列的扩增 (NASBA) 该技术一出现就被用于疾病的快速诊断和病人血清中HIV-1的定量检测。尽管RNA的扩增也可以使用反转录PCR技术(通过反转录形成单链DNA模板),NASBA相比则有自己的优势:可以在相对恒温的条件下进行(一般恒温为41摄氏度)。该技术用于医学诊断,相对传统的PCR技术更为稳定,准确。 NASBA的劣势: 滚环扩增技术 (RCA) RCA的不足: 单引物等温扩增技术(SPIA) 依赖解旋酶 DNA等温扩增技术 (HDA) 重组酶聚合酶扩增(RPA) 常规PCR必须经过变性、退火、延伸三个步骤,而PCR仪本质上就是一个控制温度升降的设备。RPA反应的zui适温度在37℃-42℃之间,无需变性,在常温下即可进行。这无疑能大大加快PCR的速度。此外,由于不需要温控设备,RPA可以真正实现便携式的快速核酸检测。 链替代扩增 (SDA) SDA的优点: (1)扩增效率高 (2)反应时间短,特异性强,不需要特殊的设备 SDA的不足: (1)SDA产物不均一,在SDA循环中总要产生一些单、双链产物,用电泳法检测时必然要出现拖尾现象。 (2)SDA产物不可能直接用于克隆、测序和表达 (3)SDA产物的检测手段有待提高,目前主要的方法是荧光偏振检测,需要用到荧光分光分光光度计,这限制了SDA在临床的广泛应用。 参考资料:资料整理自互联网 体外诊断行业,价值阅读! 资讯平台丨内容平台 |
|