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对于经常做分子生物学实验的研究者来说，能否从生物材料中获得符合质量要求的DNA，直接关系到下游实验的成败。在众多的生物材料中，各种动物组织是我们经常研究的，它对于很多生命机制的研究有着重要作用。 选择硅胶膜离心柱法还是磁珠法，很大程度上取决于样本数量。针对大批量的样本量，我们优选磁珠法。那么，在种类繁多的商品化的磁珠法组织DNA提取试剂盒重，如何选择合适的产品呢？根据我们课题组的一些经验，同在科研道路上不断探索的同伴们可以参考一下。 我们课题组常用的磁珠法组织DNA提取试剂盒主要有以下厂家：进口品牌Q、国内品牌Biog以及国内品牌T。我们就这三种磁珠法组织DNA提取试剂盒进行比较。 在进行实验前，我们需要选择合适的产品，产品的性能是我们首要考虑的因素。对于DNA提取试剂盒，我们主要关注DNA提取得率、核酸纯度、检测敏感性、操作简便性等因素。 一、DNA提取得率。DNA得率主要由以下三个决定因素：裂解液（消化液）对组织样本的裂解消化能力、磁珠对核酸的吸附能力、洗脱液对核酸的洗脱能力。DNA提取得率可以通过紫外分光光度计法测得，但是结果仅供参考，如果要精确检测DNA得率，还是要做PCR或荧光定量的。组织样本量与DNA得率成正比，结果不理想可以通过增加组织样本量来提高DNA得率。如果样本量的增加还是不能改善DNA得率，那么就应该及时考虑更换试剂盒。 根据我们课题组的经验，Q磁珠法组织DNA的提取得率，一般10-40mg组织样本在9-28ug。Biog与Q的DNA提取得率相近，10-40mg组织样本在8-30ug；T公司 25mg组织样本DNA得率在20-70ug，基本上都能满足下游PCR相关实验的要求。 二、核酸纯度。三个厂家的磁珠法组织DNA提取试剂盒获得的DNA纯度略有差别，国内品牌Biog和T的核酸提取纯度差不多，可以直接应用于PCR、qPCR、分子杂交等。进口品牌Q的纯度略高，除了以上应用，还可用于对纯度要求略高的实验，如基因分型、二代测序等。目前，组织DNA提取主要应用于易感基因检测、PCR、qPCR、分子杂交等，国产试剂盒Biog、T都能满足要求。 三、检测敏感性。我们课题组的研究表明，国内品牌Biog与进口Q在同样实验条件下提取的组织DNA检测的CT值相近，相差不超过1个CT值；而国产品牌T提取的组织DNA检测CT值较大，一般比Q晚1-2个CT值，检测敏感性不如Biog和Q。 四、操作简便性。磁珠法核酸提取如果操作过于复杂，不仅耗时，还容易导致样本间的交叉污染，引起误诊，也容易损失样本。因而，选用操作简便、流畅的组织DNA提取试剂盒非常重要。Q公司的磁珠法组织DNA提取试剂盒整个运行过程一般40min；T公司磁珠法组织DNA提取试剂盒的提取过程需要近1h；B公司的Biog磁珠法组织核酸提取试剂盒的提取过程只需20多分钟。Biog公司磁珠法组织核酸提取试剂盒在操作简便性上具有绝对优势，更适合于大批量样本的检测。 五、仪器兼容性。据了解，Biog、T品牌的磁珠法血液DNA提取试剂盒可以手工采用磁力架操作，也可配套多种型号自动化核酸提取仪使用，但是进口品牌Q一般需要配套Q厂家自产的自动化核酸提取仪使用。所以，虽然我们实验室有自动化核酸提取仪，但是考虑到进口试剂、耗材昂贵，实验成本高而无奈放弃Q公司产品，我们更倾向于选择仪器兼容性好的试剂盒。 六、产品价格。价格是影响客户选择产品的一个重要因素。对于绝大多数实验如PCR、qPCR、基因检测、分子杂交等，国产试剂盒都能满足质量要求。与国外知名品牌相比，国产试剂盒的价格较为便宜，一般只有国外品牌价格的三分之一，性价比较高；国产试剂盒Biog比T价格更为优惠。因而，对于以上实验，个人建议选用Biog、T等国产试剂盒。对提取DNA的纯度要求相对较高的一些研究，如直接测序、基因分型、细胞转染等，可考虑选用Q等国外知名品牌。 综上看来，国产品牌Biog在检测敏感性、操作简便性、仪器兼容性以及价格上占有很大优势，进口品牌Q在核酸纯度上有一定优势，国产品牌T在DNA得率、仪器兼容性上也有一定优势。我们可以根据各自实验室的经费情况以及实验需求综合考虑，选择真正适合的产品。
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