很多化学品在溶液的状态下会呈现出弱酸或者碱性,但是由于使用的目的不一,会对溶液的PH值范围有一定的要求。生物缓冲剂则是很好的调节着,而tris就是其中较为突出的缓冲剂,在使用范围上非常广泛。 缓冲溶液的用途 在有机系统中,天然缓冲溶液可将pH值保持在恒定水平,从而可能发生生化反应而不会损害有机体。当生物学家研究生物学过程时,他们必须保持相同的pH值。为此,他们使用准备好的缓冲溶液。缓冲溶液于1966年首次被提出。如今使用不同的缓冲区来调节PH值。 ![]() 为了起到作用,生物缓冲液必须满足多个标准:①缓冲剂是水溶性的,但不溶于有机溶剂;②不能够通过细胞膜;③在使用的所有实验中,必须是无毒,惰性且稳定的。 缓冲溶液天然存在于血浆中,这就是为什么血液在7.35至7.45之间保持恒定的pH值的原因。缓冲液还用于:发酵过程,染色纺织,化学分析,pH计的校准,DNA提取等。 Tris Buffer的配置 Tris是三(羟甲基)氨基甲烷的缩写,CAS77-86-1,该化合物由于等渗且无毒,因此常用于盐水中。由于Tris的pKa为8.1,pH值为7至9,因此Tris缓冲溶液也常用于包括DNA提取在内的一系列化学分析和程序中。重要的是tris缓冲溶液中的pH确实会随着溶液温度的变化而变化。 ![]() 材料: 根据所需溶液的摩尔浓度和所需缓冲液的数量,计算所需各项的量。 三(羟甲基)氨基甲烷 蒸馏去离子水 盐酸 程序: 首先确定要制备的Tris缓冲液的浓度(摩尔浓度)和体积。例如,用于盐水的Tris缓冲溶液的范围从10到100 mM。一旦确定了所要制备的物质,就可以通过将缓冲液的摩尔浓度乘以制备的缓冲液体积来计算所需的Tris摩尔数。(Tris的摩尔数= mol / L x L) 接下来,通过将摩尔数乘以Tris的分子量(121.14 g / mol),确定这是多少克Tris。 Tris克=(摩尔)x(121.14 g / mol) 将Tris溶解在蒸馏去离子水中,为所需最终体积的1/3至1/2。 混入HCl(例如1M HCl),直到PH计为您的Tris缓冲溶液提供所需的pH 为止。 用水稀释缓冲液以达到所需的最终溶液体积。 制备溶液后,可将其在室温下无菌位置保存数月。Tris缓冲溶液的保质期长,因为该溶液不含任何蛋白质。 |
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