在我们进行动物疾病模型构建的基础研究过程中,往往需要借助注射技术,将药物、病毒载体、荧光染料等注射到动物体内,以构建动物模型,亦或是研究其作用机制及代谢途径等,来观察疾病发生发展规律,研究防治措施。 下面就和大家介绍几种常用的动物注射技术 一、腹腔注射 ①抓取小鼠,使其腹部朝上头部略向下垂; ②抓紧背部皮肤使腹部皮肤紧绷,于腹腔下边缘位置(左/右侧)进针; ③针头沿皮下向前推进2-3cm,针头与皮肤呈45°角刺入腹膜; ④回抽无回流物,缓慢推入药物; ⑤腹腔注射宜用等渗药液,不宜刺激性药液; ⑥循环途径:肠系膜上静脉→肝门静脉→肝→肝静脉→下腔静脉→进入血液循环; ⑦参考给药量:0.01-0.02ml/g(小鼠)。 二、脑立体定位注射 ①称重、麻醉小鼠; ②用酒精棉擦小鼠头部,剃毛; ③将小鼠头部固定于脑定位仪上,先将小鼠上颚牙齿挂到定位仪上,旋动头部螺旋使其刚好压住老鼠的鼻子,将耳杆插入到小鼠双耳道,调节左右侧耳杆使其头部稳定保持中心位置; ④碘酒、酒精再次擦拭小鼠头部,用手术刀从头部中央划开一个小口,去除颅骨表面结缔组织,暴露前后囟; ⑤将注射针固定于定位仪上,调整注射速度,小心将针头下降至头颅钻孔水平面,按照注射位点参数,将注射针缓慢下降进行注射; ⑥注射完成后,留针5-10min后慢慢将针头退出,以便药物很好的被吸收; ⑦用捏子将伤口两侧皮肤扯到一块,用缝合剪缝好,将小鼠放在热毯上(也可肌肉注射抗生素),便于苏醒; ⑧注射针用PBS清洗,将所用手术器械用酒精擦拭干净,柜台内收拾干净,UV照射三十分钟。 注射部位:Vgat- Cre小鼠VTA 三、皮下注射 ①抓取小鼠,将小鼠腋窝处正对实验人员; ②注射针从腹腔上边缘刺入皮下,向前推入腋窝处皮下,注意避免注射到皮内与肌肉; ③轻轻抽吸无回流物,缓慢注入药物; ④推针时注射器旋转180度后拔出,防止药液外漏; ⑤循环途径:经皮下和肌肉中的毛细血管吸收,吸收没有静脉注射完全; ⑥参考给药量:0.01-0.03ml/g(小鼠)。 四、眼内注射(玻璃体腔注射) ①麻醉小鼠; ②调整小鼠头位:让小鼠眼球保持角膜缘水平位; ③暴露眼球:上下外拉眼皮,挤出眼球,暴露部分巩膜; ④注射:角膜缘后1mm,注意避开血管,调整注射器,进针;缓慢推注后留针30s,迅速出针; ⑤眼球复位:轻轻按压角膜使眼球进入眼眶内; ⑥动物苏醒后放入笼中饲养。 玻璃体腔注射AAV-Syn-GcaMP6s病毒 五、尾静脉注射技术 ①使用小鼠固定器,酒精棉擦拭小鼠尾部,尾静脉肉眼清晰可见; ②距尾尖1/3处小于30度角度进针后见回血,立即注射,进针深度为针头2/3; ③如无阻力,表示针头已进入静脉,可继续注入,注射时如遇阻力,出现白色皮丘,需要在上方1cm处再次注射; ④平缓注射,不可注射含有空气的液体; ⑤注射完毕后,用干棉球按压伤口3-5min; ⑥循环途径:直接进入血液循环; ⑦参考给药量:0.005-0.01ml/g(小鼠)。 注射方式:尾静脉 六、肌肉注射 ①抓取小鼠,使其注射部位针对实验人员; ②将针头垂直迅速刺入外侧肌肉,进针深度为针头2/3; ③回抽针栓如无回血,将药物注入; ④注射完毕后,用干棉球按压伤口3-5min; ⑤药物水溶液吸收十分迅速,适用于油溶液和某些刺激性物质; ⑥循环途径:直接进入血液循环; ⑦参考给药量:0.05-0.1ml(小鼠)。 学会网站 www.cell-nerve.org |
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