【原】各种类型的基因编辑鼠如何建系？

完全性基因敲除、基因敲入（点突变）鼠如何建系？

区别：

1. 转基因

转基因项目具有插入位点及拷贝数不确定的特点，获得的F0代鼠可能各不相同，F0代不能相互交配。需要将F0与野生型多传几代，待基因型稳定后通过其他实验手段筛选出优先传代的品系继续繁殖。

2. CRISPR/Cas9技术构建的完全性基因敲除、基因敲入（点突变）鼠

CRISPR/Cas9技术构建的F0代阳性鼠由于切割效率和非同源修复可能会出现不同的line，需要与野生型鼠交配获得稳定基因型的F1代阳性鼠。不同line的后代同样不建议相互交配。

条件性敲除（敲入）鼠如何建系？

F0代与野生鼠互配获得F1代杂合子，F1代杂合子（flox/+）互配得到F2代纯合子（flox/flox），F2代纯合子（flox/flox）与全身/组织特异性工具鼠交配获得F3代（flox/+, Cre），F3代（flox/+, Cre）互配得到F4代（flox/flox, Cre），即cKO/cKI纯合子。

条件性的项目需要与全身/组织特异性工具鼠交配达到目的，所以在繁殖过程中可根据全身/组织特异性工具鼠自身的特点安排繁殖。

备注：

1. 如果是通过打靶构建的全身/组织特异性工具鼠，要注意选择与目的基因不在同一条染色体上，以免繁殖不到cKO/cKI纯合子。

2. 有生殖细胞泄露风险的Cre工具鼠，繁殖时按照建议性别选择不同基因型鼠。

3. 诱导型的Cre工具鼠，需要加药后才能实现特异组织删除。

4. F1代若有剩余的flox杂合鼠（flox/+），或想要加快获得目标鼠，第2步可以用flox/+直接配Cre工具鼠，可缩短一代周期。

即使是组织特异性工具鼠，也可能在其他组织有泄露表达的风险。