在这项工作中,来自西奈山伊坎医学院的研究人员提出了一种基于二代测序(NGS)的方法来鉴定共培养的脂肪细胞和巨噬细胞之间的EV介导的mRNA交换。研究人员进行分子和基因组分析,并联合了RNA测序(RNA-seq)和基因分型的数据以追踪在细胞间转移的“序列不同的mRNA”。研究人员鉴定了8??种从巨噬细胞转移到脂肪细胞的mRNA,21种从脂肪细胞转移到巨噬细胞的mRNA。这些mRNA能够揭示细胞的一些生物学功能,包括细胞外基质、细胞粘附、糖蛋白和信号肽的mRNA。 图:用于在共培养系统中鉴定脂肪细胞和巨噬细胞之间的mRNA转移的实验流程 (a)显示用于细胞培养和样品采集的实验设计的图解,包括(a)单独培养的脂肪细胞,其中两个细胞沉淀样品ADaloneN1和ADaloneN2被回收用于RNA-seq,脂肪细胞B1和B2是使用基因分型的技术进行Illumina Omni2.5SNP array,外泌体提取物ADexosome用于RNA-seq; (b)与(a)方法相同,利用巨噬细胞进行试验; (c)通过RNA-seq分析两种细胞系的共培养,其中三种脂肪细胞沉淀样品ADcoN1-N3,三种巨噬细胞沉淀样品MOcoN1-N3和外泌体样品ADMOexosome。 这项研究揭示了脂肪细胞和巨噬细胞之间的通过EV介导的RNA通讯,这可能在糖尿病患者中出现的胰岛素抵抗中发挥重要作用。这项工作建立了一个新的方法,适用于检测许多细胞系统的遗传物质交换,并有可能扩展到体内研究。
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