【原】IHC染色/免疫组化实验技术服务

【技术原理】

抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量。

【实验流程】

技术总结

 【常见问题】

1、无/弱染色

     烤片温度过高，推荐56℃-60℃1-2h；

     一抗是否适用固定液和石蜡切片，使用浓度是否过低，孵育是否时间过短等。

2、非特异性背景染色

    是否灭活内源性过氧化物酶；

    孵育过程中干片；

    抗原热修复过度。

3、染色过深

    一抗浓度过高；
           染色试浓度过高或孵育时间过长；
           染色剂浓度过高或孵育时间过长。

【注意事项】

1、使用3%过氧化氢溶液消除内源性过氧化酶活性时，请勿孵育过长时间，一般为5—10分钟；

2、对于较易产生脱片的部分组织如皮肤、骨组织、脑组织等尽量避免使用微波修复和高压修复，减少其脱片的风险；

3、使用DAB显色时，显色剂停留时间过长会造成染色过深，可根据实验温度及实验结果适当调整染色时间。