【原】油茶的愈伤组织诱导，悬浮培养和原生质体分离

Callus induction, suspension culture and protoplast isolation in Camellia oleifera

第一作者

Sufang Li and Tianwen Ye

第一单位

中南林业

通讯作者

Shixin Xiao

Abstract

背景+问题：Camellia oleifera is a woody edible oil crop with economical importance. 

主要研究：This study established an efficient protocol for the induction of callus, the multiplication of a suspension cell line, and the isolation and purification of protoplasts in Camellia oleifera.

结果1-callus induction：It is shown that the callus induction was best when anthers were treated with the hormone of 0.5 mg/L NAA (Naphthaleneacetic acid), 2.0 mg/L 2,4-D (2,4-Dichlorophenoxyacetic acid) and 0.5 mg/L 6-BA (6-Benzylaminopurine) at 4 °C for 15 days. Callus was further multiplied on MS (Murashige and Skoog) medium augmented with 5% coconut water, 2 mg/L 2,4-D, 0.5 mg/L 6-BA, pH 5.8.

结果2-suspension culture：Callus was further multiplied on MS (Murashige and Skoog) medium augmented with 5% coconut water, 2 mg/L 2,4-D, 0.5 mg/L 6-BA, pH 5.8. Though three types of induced callus transferred to the same liquid medium with the ratio of 1 g callus inoculated into 30 ml liquid medium, it was found that the suspension culture effect of loose particles callus was the best. 

结果3-protoplast：The maximum yield (11.7 × 106/g·FW) and highest viability (95.1%) of protoplast were reached when cell suspension (cultured for 6 days) was inoculated for 14 h in enzyme solution made of 0.4 mol/L mannitol mixture solution, 1.0% (w/v) Cellulase R-10 and 1.0% (w/v) Macerozyme R-10. 

结论：The study lays a foundation for future research in cell fusion and transient gene expression in Camellia oleifera.

摘  要

油茶是具有重要经济作用的木质食用油作物。这项研究建立了一种有效的方案，用于诱导油茶中的愈伤组织，悬浮细胞系的繁殖以及原生质体的分离和纯化。结果表明，在4°C下，用0.5 mg / L NAA（萘乙酸），2.0 mg / L 2,4-D（2,4-二氯苯氧基乙酸）和0.5 mg / L 6-BA（6-苄基氨基嘌呤）处理花药15天时，愈伤组织的诱导最佳。愈伤组织在用5％椰子水，2 mg / L 2,4-D，0.5 mg / L 6-BA，pH 5.8增强的MS（Murashige和Skoog）培养基上进一步繁殖。以相同比例（1 g愈伤组织的比例转移到30 ml液体培养基中），将三种类型的诱导愈伤组织进行液体培养基转移，发现散粒愈伤组织的悬浮培养效果是最好的。在0.4 mol / L甘露糖醇， 1.0％（w / v）的纤维素酶R-10和1.0％（w / v）的Macerozyme R-10混合溶液制成的酶溶液中接种细胞悬浮液（培养6天）14小时后，原生质体达到最大产量（11.7×106 / g·FW）和最高活力（95.1％）。该研究为油茶的细胞融合和瞬时基因表达的进一步研究奠定了基础。

DOI: https:///10.1016/j.scienta.2021.110193

Journal: Scientia Horticulturae

Impact Factor：2.769

Published date: 24 April 2021

四月

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