【原】CD4人源化小鼠模型介绍

品系背景：C57BL/6J

品系说明：

• CD4在小鼠体内具有正常的生理表达和调节模式：免疫细胞分布和辅助性T细胞活性不变。

• 小鼠靶基因不表达。

研究应用：

• 本模型可用于评估hCD4靶向药物在体内的有效性和安全性。

• 通常用于炎症、自身免疫性疾病、免疫肿瘤学和HIV感染领域。

模型验证：

• CD4表达检测

 

图1. 人源CD4取代了鼠源CD4。

用mAbs（αmCD4，αhCD4）对取自野生型和hCD4小鼠的血样进行标记，并通过流式细胞仪进行分析。在hCD4小鼠的PBMC中能检测到hCD4的表达，但检测不到mCD4的表达。

• 免疫细胞比例检测

 

图2. 免疫细胞分布不变。

hCD4小鼠脾脏中B细胞、NK细胞和T细胞的百分比和野生型小鼠的相同。用不同的mAb组合对脾细胞进行标记，通过流式细胞术对淋巴细胞亚群比例进行检测。灰色柱代表野生型小鼠，阴影柱代表hCD4小鼠。

• 细胞因子表达检测

 

图3. 细胞因子表达谱：hCD4小鼠在刀豆蛋白A（ConA）刺激后显示与野生型小鼠相似的细胞因子表达水平。先用ConA刺激小鼠脾细胞，然后用3-Plex Luminex试剂盒检测培养上清液中IL-2、IFN-γ和IL-4的浓度。黑色柱代表野生型小鼠，阴影柱代表hCD4小鼠。

• Ig型检测

 

图4. 相似的Ig型：hCD4小鼠显示出与野生型小鼠相似的αKLH抗体同种型（isotype）。在用钥孔血蓝蛋白（KLH）和弗氏佐剂（CFA）免疫野生型（WT）和纯合hCD4小鼠（HO CD4）后的第28天，通过双抗体夹心法（sandwich ELISA）在小鼠血清中检测αKLH特异性IgG1和IgG2b多克隆抗体水平，并根据OD值绘制不同的稀释度。