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反(逆)转录病毒载体是什么?

 生物学渣 2021-07-18

分类

泡沫病毒类

慢病毒类致癌病毒类

结构组成及表达元件

从5’端开始依次是:①5’长末端重复序列(5’-LTR),带有增强子和启动子序列;②psi序列,又称ψ序列,是病毒包装所必须的信号序列;③gag,编码病毒衣壳蛋白;④pol,编码反转录酶和整合酶(Int);⑤env,编码病毒颗粒外层包装蛋白;⑥3’长末端重复序列(3’-LTR),带有poly A加尾信号序列。

特点或优点

一类含单链RNA的动物病毒。它的基因组含有2条相同的正链RNA分子,包装成二倍体病毒颗粒。(1)在大多数情况下,反转录病毒的肿瘤基因(onc)都能够在正常的细胞中转录。 2)反转录病毒的寄主范围相当广,包括无脊椎动物和脊椎动物。3)反转录病毒具有强启动子,外源基因可得到有效表达。4)反转录病毒不但感染效率高,而且不招致寄主细胞的死亡

备注

载体的构建: 分离原病毒DNA→删去部分序列→组入选择性标记基因、目的基因和调控元件→克隆到含有大肠杆菌复制起始位点的克隆载体→转化大肠杆菌→获得反转录病毒克隆载体→ 辅助细胞系(包装细胞系) →扩增

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