当单个细胞在体外增殖6代以上,其后代所组成的细胞群体,成为集落或克隆。每个克隆含有50以上的细胞,大小在0.3-1.0mm之间。集落形成率表示细胞的独立生存能力。克隆形成率反映细胞两个重要性状:细胞群体依赖性、增殖能力。由于细胞生物学性状不同,细胞克隆形成率差别也很大: a).初代培养细胞克隆形成率弱,传代细胞系强; b).二倍体细胞克隆形成率弱,转化细胞系强; c).正常细胞克隆形成率弱,肿瘤细胞强。 实验方法 1.平板集落形成实验:本法适用于贴壁生长的细胞和正常培养的细胞。 注:适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。试验成功的关键是细胞悬液的制备和接种密度。细胞一定要分散得好,不能有细胞团,接种密度不能过大。 2.软琼脂集落形成实验:本法适用于非锚着依赖性生长的细胞,如骨髓造血干细胞、肿瘤细胞株、转化细胞系。 注:正常细胞在悬浮状态下不能增殖,不适用于软琼脂克隆形成试验。 |
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