【原】实验诊断-临床常见病原体检测：病毒性肝炎检测

病毒性肝炎检测

病毒性肝炎检测

一、甲型肝炎病毒检测

（一）抗原检测

HAVAg一般于发病前1～15天可从粪中排出，2周后消失，临床上不易捕捉到。粪便中HAV或HAV抗原颗粒检测可作为甲肝急性感染的证据。

（二）抗体检测

1.抗HAV-IgM 在发病后2周抗HAV-IgM的阳性率为100％，12个月时可为阴性。

2.抗HAV-IgA 早期和急性期，由粪便中测得抗HAV-IgA呈阳性反应，是早期诊断甲肝的指标之一。

3.抗HAV-IgG 阳性出现于恢复期且持久存在，是获得免疫力的标志，提示既往感染，可作为流行病学调查的指标。

（三）HAV-RNA测定

HAV-RNA阳性对诊断特别对早期诊断具有特异性。

二、乙型肝炎病毒检测

（一）乙肝六项检测

1.HBsAg  阳性见于急性乙肝的潜伏期，发病时达高峰；如果发病后3个月不转阴，则易发展成慢性乙型肝炎或肝硬化。携带者 HBsAg也呈阳性。

2.抗-HBs  是保护性抗体，可阻止HBV穿过细胞膜进入新的肝细胞。抗-HBs一般在发病后3～6月才出现，可持续多年。

3.HBeAg  阳性表明乙型肝炎处于活动期，并有较强的传染性。

4.抗-HBe  阳性可见于慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌。

5.抗-HBc  抗-HBc总抗体主要反映的是抗-HBc IgG。抗-HBc比HBsAg更敏感，可作为HBsAg阴性的HBV感染的敏感指标。在HBsAg携带者中多为阳性。

6.HBcAg  阳性，提示病人血清中有感染性的HBV存在，含量较多表示复制活跃，传染性强，预后较差。

(二) 乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S1和前S1抗体测定

前S1抗原可识别肝细胞表面特异性的病毒受体，是非常重要的传染性指标。同时血清前S1抗原的存在与病毒复制的关系密切。作为病毒复制指标较HBeAg敏感，可以反映HBeAg阴性乙肝病人体内的病毒活动状况，避免由于HBeAg阴性造成的误诊和漏检，对“二对半”检测起重要的补充作用。前S1抗原阴转越早、前S1抗体阳转越早，病人病程越短、预后越好。

（三）乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S2和前S2抗体测定

    Pre-S2阳性提示HBV复制异常活跃，有传染性。抗 Pre-S2阳性见于乙肝急性期及恢复早期；提示HBV已被清除，预后较好。

（四） 乙型肝炎病毒DNA测定

      HBV-DNA阳性是诊断乙型肝炎的佐证，表明HBV复制及有传染性。也用于监测应用 HBsAg疫苗后垂直传播的阻断效果，若 HBV-DNA阳性表明疫苗阻断效果不佳。

（五）乙型肝炎病毒YMDD变异测定

      YMDD是HBV反转录酶发挥催化活性所必需的关键结构。目前临床上广泛使用的胞苷类似物拉咪呋啶(lamivudine)等抗HBV药物，作用靶位主要是HBV反转录酶，通过与底物dNTP竞争结合以抑制HBV的反转录和复制。当病毒YMDD中M突变为异亮氨酸（I）或缬氨酸(V)， 就可能引起HBV该类药物的药效丧失，从而产生耐药性。YMDD测定结果为临床抗HBV治疗用药提供了实验室诊断依据。

三、丙型肝炎病毒检测

（一）丙型肝炎病毒RNA测定

阳性提示HCV复制活跃，传染性强；HCV-RNA转阴提示HCV复制受抑，预后较好。连续观察HCV-RNA，结合抗-HCV的动态变化，可作为丙肝的预后判断和干扰素等药物疗效的评价指标。检测HCV-RNA，对研究丙型肝炎发病机理和传播途径有重要价值。

（二）丙型肝炎病毒抗体测定

1.抗-HCV IgM抗体  主要用于早期诊断，抗-HCV IgM抗体一般在发病的2～4天出现，持续阳性常可作为转为慢性肝炎的指标，或是提示病毒持续存在并有复制。

2.抗-HCV IgG抗体  阳性表明已有 HCV感染但不能作为感染的早期指标。经常接受血制品（血浆、全血）治疗的病人可以合并HCV的感染，易使病变转为慢性、肝硬化或肝癌。

四、丁型肝炎病毒检测

（一）丁型肝炎病毒抗原测定

丁型肝炎病毒抗原（HDVAg）出现较早，但仅持续 l～2周。HDVAg与HBsAg同时阳性，表示丁型和乙型肝炎病毒同时感染，病人可迅速发展为慢性或急性重症肝炎。

（二）丁型肝炎病毒抗体测定

1.抗-HDV IgG  阳性只能在HBsAg阳性的血清中测得，是诊断丁型肝炎的可靠指标，病愈后仍可存在多年。

2.抗-HDV IgM  出现较早，一般持续2～20周，可用于丁型肝炎早期诊断。

（三）丁型肝炎病毒RNA测定

      阳性可明确诊断为丁型肝炎。HDV与HBV重叠感染的病人易迅速发展成肝硬化或肝癌。

五、戊型肝炎病毒检测

1.抗-HEV IgM  95%的急性期病人呈阳性反应，8个月后全部消失。抗-HEV IgM的持续时间较短，可作为急性感染的诊断指标。

2.抗-HEV IgG  恢复期抗-HEVIgG效价超过或等于急性期4倍，提示有HEV新近感染。

3.HEV RNA  病人血清、胆汁和粪便中的HEV RNA阳性可诊断急性戊型肝炎，急性期血清中HEV RNA的检出率可达70%。此外，在对抗体检测结果进行确证，判断病人排毒期限，分子流行病学研究等方面也具有临床意义。

六、庚型肝炎病毒检测

1.抗-HGV  阳性表示曾感染过HGV，多见于输血后肝炎或使用血液制品引起HGV合并HCV 感染的病人。但ELISA法特异性和敏感性不高，尚需继续完善。

2.HGV RNA  阳性表明有HGV存在。HGV对人类的致病性尚存在争议。一方面，HGV在各型肝炎及其高危人群中均以一定比例存在，尤其在非甲、非戊型肝炎病人中有一定的检出率，在急性重型肝炎中也发现了HGV， 提示可能是人类肝炎的一种病原体， 且在重型肝炎中起一定作用。另一方面， HGV RNA在肝/血浆的比率远低于其他嗜肝病毒，表明HGV的主要复制地可能不在肝脏：HGV感染者多缺乏或仅有轻微肝损害；HGV RNA毒血症虽可持续多年但并不导致慢性肝损害等。这些现象表明HGV可能并非嗜肝病毒。

七、输血传播病毒(TTV病毒) 检测

TTV DNA阳性表明有TTV存在。普通人群中TTV阳性率较高，国内献血员阳性率为11%～15%。由于TTV 具有高度基因变异性，不同基因亚型抗体间存在交叉反应，有些核酸阳性者因病毒量较少，不足以刺激免疫系统发生免疫应答而产生抗体；或因为感染时间较短尚未产生抗体可造成ELISA实验结果与PCR检测结果不一致，致使ELISA法的临床应用受到一定的限制。

考试无捷径、学习有方法