实时荧光定量PCR技术(Real-time quantitative PCR),是指在PCR反应体系中加入荧光基因,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 荧光定量PCR以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点成为了分子生物学研究中的重要工具,目前已得到广泛应用(如转基因动植物检测、RNAi基因失活率检测、病原微生物或病毒含量检测、基因差异表达、基因分型)。 内容 1 根据目的基因设计引物及引物合成 2 RNA抽提+逆转录 3 RNA定量及质量分析 4 使用荧光染料SYBR Green法进行实时定量PCR(重复三次) 5 数据处理 |
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