【原】人—脑脊液单细胞悬液制备

背景介绍

脑脊液（CSF）是由脉络丛上皮细胞分泌的，为无色透明的液体，包围并支持着整个脑及脊髓，含蛋白质很少，但有较高浓度的Na^＋、K^＋和Cl^－，并有少许脱落细胞和淋巴细胞，与血浆和淋巴液的性质相似，略带粘性。

在健康条件下，脑脊液的非细胞部分主要是血清的超滤液。相比之下，完全来自造血谱系的CSF细胞表现出与血液显著不同的严格控制的细胞组成，CSF细胞的浓度比血液中的浓度低约1000倍，且只对每位患者可进行的采样有限。技术方法必须考虑样本量以及样本稳定性。

因此，在脑脊液解离过程中，采用离心收集的方法制备单细胞悬液，同时需要注意分离时间以及防止对细胞的破坏。

脑脊液示意图

材料和试剂耗材

仪器耗材

实验流程

1. 取样后将脑脊液快速收集至离心管中，4℃，300 g离心10 min，去除上清液。

2. 将脑脊液细胞重悬在5mL X-Vivo15培养基中。

3. 将细胞悬浮液再次以400 g离心5 min，去除上清，然后重新悬浮在40µL X-Vivo15 培养基中。

4. 取 6µL 悬液与台盼蓝混合进行细胞计数及质检。

结果展示

所获细胞悬液：活率大于97 %，结团率低，背景干净。