【原】诱导分化实验操作步骤

（注：A、B液配置方法详见产品说明书）

❶ 加1mL 0.1%明胶到六孔板中，摇匀，使其能均匀覆盖各孔底面。

❷ 将铺有0.1%明胶的六孔板放置在超净台或CO₂培养箱至少30min。

❸ 30min后吸去明胶即可用于接种细胞，或等待六孔板晾干再接种。

❹ 将待诱导的间充质干细胞按照2×10⁴cells/cm²的细胞密度接种于六孔板中，每孔加入2mL普通完全培养基。

❺ 细胞置于37℃、5%CO₂、饱和湿度的CO₂培养箱中培养。

❻ 当细胞汇合度达到100%时，小心地将孔内完全培养基吸走，向六孔板中加入2mL 间充质干细胞成脂诱导分化培养基A液。

❼ 诱导3天后，吸去六孔板中的A液，加入2mL 间充质干细胞成脂诱导分化培养基B液。

❽ 维持1天后，吸去B液，换回A液进行诱导。

❾ A液和B液交替使用，期间需每天观察细胞状态。若在A液诱导过程中出现细胞收缩、死亡的情况，请及时更换为B液，直至细胞状态恢复。

❿ 重复诱导和维持过程，直到出现足量、大小适宜的脂滴，即可准备染色。