SOP文件||新冠病毒核酸检测实验室的质量管理程序

慈诚_多吉 2022-06-30 发布于辽宁

展开全文

实验室SOP文件

一、目的

规范新冠病毒核酸检测实验室的质量管理程序，保证检测结果的准确性和及时性。

二、适应范围

新冠病毒核酸检测实验室。

三、责任人

从事新冠病毒核酸检测的技术人员。

四、内容

1. 参考依据：

医疗机构新型冠状病毒核酸检测工作手册（试行第二版）、《新型冠状病毒核酸快速检测临床规范化应用专家共识》、《实时荧光PCR技术》、《新型冠状病毒感染临床检测技术》

2. 原则：

为保证最终报告给临床医师和患者的新冠病毒核酸检测结果的准确性和及时性，从事新冠病毒核酸检测的实验室应采取一系列有计划的质量控制措施，这既是我们通常所说的质量保证。实验室工作的质量保证应覆盖整个新冠病毒病毒核酸检测流程，包括分析前、分析中和分析后各个环节，实验室需要充分了解本实验室整个流程，并且在合适的关键点应用恰当的质量控制程序。室内质控和室间质评均是质量保证的重要组成部分。

3. 内容：

3.1 核酸检测前的质量管理：

新冠病毒核酸检测前的质量管理针对的是分析前质控环节，主要涉及人员培训、实验室环境设施、仪器设备及管理、试剂的性能验证和质检、标本的采集运送和保存的质量控制，以及标准操作程序的编写等。

（1）人：指人员培训及能力评估，为避免由人员能力差异而导致检测结果异常的问题，从事病毒核酸检测的人员应按照培训计划接受培训，培训应包括外部培训和内部培训。

（2）机：指仪器设备的正确操作、日常维护和定期校准。

（3）料：指合格的临床标本、使用试剂的性能验证和耗材的质检。（合格的临床标本是严格遵守指南进行的标本采集、运送和保存要求的标本，从而可以保核酸检测结果的可靠性，避免假阴性。检测试剂要求是NMPA批准的，并且使用前进行性能验证实验符合要求的，另外，在使用中，还应该对每一批试剂盒进行质检（即批检）。实验室使用的配套耗材，每批次都应进行质检，合格后方能使用。性能验证和质检都应该有相应的SOP文件，并且每次检测后要有原始记录并归档保存。）

（4）法：主要指实验室内可操作的SOP文件，并要求实验室全员遵守。（实验室应针对每个环节均建立相应具有可操作性的SOP，SOP文件一旦确认，不可轻易更改。另外，整个检测流程中所涉及的记录也是实验室质量保证的关键环节。）

（5）环：指实验室环境、实验室分区、温度、湿度和通风。加强环境因素的管理是为了避免其对检验结果准确性造成影响及造成实验室污染。

3.2 核酸检测中的质量管理：

（1）核酸检测分析中的步骤主要包括试剂准备、样本处理（核酸提取）、核酸扩增、核酸检测和结果分析等，其中核酸提取质量和扩增检测过程会直接影响检测结果，需进行严格的质量控制。

（2）室内质控设置：

① 常规PCR检测：

依据医疗机构新型冠状病毒核酸检测工作手册（试行第二版）要求

- 质控品应与所有标本同时检测。

-每批检测至少有1份弱阳性质控品（第三方质控品，通常为检出限的1.5-3倍）、3份阴性质控品（生理盐水）。

-质控品随机放在临床标本中，参与从提取到扩增的全过程。

②核酸快速检测：

依据《新型冠状病毒核酸快速检测临床规范化应用专家共识》

-室内质控品包括阴性质控品（生理盐水）和弱阳性质控品（浓度为检测限的1.5-3倍）。

-每次开机先检测弱阳性质控品和阴性质控品，质控合格后，开始进行临床标本检测，开机检测达到24小时，或者未达到24小时但连续检测标本数量达到50个，均应再次检测弱阳性质控品，以监测是否在控。

-开机阴性质控品后，可不再做阴性质控品。但一旦出现阳性样本，即为失控。开机检测阴性质控品（生理盐水），应关注是否存在内对照的污染。

（3）弱阳性质控品的统计学质控方法

-同时分析弱阳性质控品检测的不同基因（2或3个基因）。

-通过检测的Ct值进行室内质控。

-将Ct值结果绘制在Levey-Jennings质控图上，通过观察检测值是否在可接受范围内、是否有突然上升或下降等监测检测系统的性能。

对于新冠病毒核酸检测项目来说，目前其预期用途为临床诊断或鉴别诊断，为定性检测，缺乏总允许误差的规定，也缺乏检测标准化，但已知浓度的质控品Ct值的变化可反映在不同批次测定中得到的核酸检测结果之间的一致性，因此，采取的质控措施应保证检测结果的质量符合临床预期用途，可通过将Ct值结果绘制在Levey-Jennings质控图上，通过观察检测值是否在可接受范围内、是否有突然上升或下降等监测检测系统的性能。

3.3 核酸检测后的质量管理

新冠病毒核酸检测报告的规范化，依据医疗机构新型冠状病毒核酸检测工作手册（试行第二版）要求

-采集时间、接收时间、检测时间等要精确到分钟

-注明检测方法学和检测下限

-备注结果解释