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这里有一个技术难题等你解锁 卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤之一，其发病隐匿，致死率占各类妇科肿瘤的首位。研究卵巢癌发生、复发和耐药机制等，有针对性地制定治疗策略刻不容缓。如何高效地从卵巢癌中分离培养卵巢癌细胞，对卵巢癌的研究至关重要。 为此，我们做了什么技术突破 成功在体外培养了原位卵巢癌，算不算 并且使该卵巢癌在体外可增殖哦 后期还会用于药物药敏筛选呢 悄悄告诉你，我们培养细胞有一套 采用新型3D细胞培养技术 养好细胞不再难 有人会说，不就养个细胞，有什么难的 真的挺难的~不信你看~ [实例展示] 获得2例卵巢癌患者的捐赠组织，进行了2D培养与3D培养。 经培养发现：2例卵巢细胞在传统的平面培养上，细胞形态并未发现明显的差异，在一周内还具有卵巢癌荷包蛋特征样细胞形态，同时也含有一些贴壁生长的间质细胞，随着培养时间的增长，卵巢癌细胞逐渐退化或死亡，其生长空间被间充质细胞所占据（见图1）。这是目前原位肿瘤细胞体外培养的一道瓶颈。
图1. 2例捐献者分离细胞在2D培养条件下的生长情况 在三维培养条件下，可见细胞密度随培养时间的增加在逐渐增多且生长良好，随着培养时间的延长并未出现平面培养上的纤维状细胞逐渐增多的现象，可见三维培养更有利于肿瘤细胞的生长（见图2）。同时，我们还通过MTT法检测了细胞在材料中的增殖情况（见图3）发现：细胞的增殖活性与细胞状态呈正相关，患者1较患者2组织分离获得的细胞活性低，这可能是卵巢癌的种类与分级有关。
图2. 2例捐献者分离细胞在3D培养条件下的生长情况
图3. 2例捐献者分离细胞在3D培养条件下的增殖情况 从三维培养的增殖检测数据也不难发现，在体外三维培养条件下癌细胞的增殖速度逐渐减缓，这也更契合生物体内肿瘤的发生发展规律，肿瘤细胞虽较正常细胞增殖迅速，但在体内肿瘤潜伏期及肿瘤灶转移等均是一个隐秘而漫长的过程。 针对实验室条件培养的2例卵巢癌细胞的三维形态，我们对照卵巢癌组织的病理分型特征，对此2例卵巢癌肿瘤进行了初步诊断，获得以下结论： 1. 患者2的卵巢癌肿瘤分级高于患者1； 2. 从三维细胞培养形态上，患者1分离获得的卵巢癌细胞呈荷包蛋样且细胞大小不一，在分离处理过程中有大量黄色黏液流出，且在分离初期细胞多聚团，考虑为黏液性卵巢癌； 3. 从三维细胞培养形态上，患者2分离获得的卵巢癌细胞细胞个大，呈显著的荷包蛋样且增殖速度较快，肿瘤细胞恶性程度较高，可能为上皮性囊腔肿瘤，可能存在转移灶。 实验取得了令人振奋的结果： 经与患者病理检测报告对比，最终发现我们根据三维培养的细胞形态得到的初步判断结果与最终病理检测结果基本一致。
特别说明：本实验由华中科技大学同济医院·陈刚教授团队，提供卵巢癌组织材料及技术指导。 到此我们不得不提 本项研究最关键的技术——3D细胞培养 成功解决细胞培养这一技术难题 3D细胞培养是一种模拟体内三维生长环境的细胞培养方式。通过让细胞聚集成3D球体或者将细胞在成分结构类似于实体组织的三维结构载体上粘附、伸展和生长，从时间和空间上共同调控细胞的增殖和分化，使组织结构和功能得以较大程度保留。 与2D培养相比，3D培养更真实地再现了细胞与细胞之间以及细胞与细胞间微环境的相互作用，更准确地模拟组织在正常生理状态下情况及反应，突破了传统细胞培养耗时繁琐，细胞产量微小等局限性。 应用：随着3D细胞培养技术不断完善，以此为基础的新型高通量药物检测及筛查系统正在成为生物医药领域的技术新热点，并逐渐在药物研发、疗效评估，毒性检测及临床检测等方面发挥着越来越广泛的作用。 重磅出击 (Atagenix—3D细胞培养) 我们的3D细胞培养技术秘籍 ——新型的3D细胞培养材料AccuraMatrix 国际领先、自主知识产权的新型生物构架，用于体外细胞3D培养及类组织器官（Organoid）的建立。 普健生物3D培养材料优点1高纯度、低免疫原性； 2多层气孔基质：与生理细胞外基质相似； 3细胞附着的可质子化表面：增强细胞附着； 4可调节物理和化学性质的基质材料：满足不同类型细胞生长的特定要求； 5使用广泛，可应用于细胞生长和分化、干细胞研究、代谢和毒理学研究、体内外血管生长研究、体外肿瘤细胞生物学特性研究、肿瘤异种移植模型研究等领域。 |
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