293细胞系介绍

HEK293细胞，也称为HEK-293、HEK细胞或简称HEK，代表人胚肾细胞，是众所周知的最重要的哺乳动物瞬时生产瞬转细胞之一。这种细胞类型流行的主要原因之一是HEK细胞具有高转染效率，可用于高表达水平的稳定和瞬时转染。

HEK293细胞的历史：

HEK293细胞的历史可以追溯到1973年，当时荷兰莱顿大学的Alex Van Der Eb和他的团队培养了这种细胞，其中一位博士后Frank Graham通过腺病毒5进行了转染，细胞命名中的数字可以追溯到他的第293次实验产生的原始细胞克隆这一事实。由于存在Ad5 E1A/B基因，HEK293常用于生产腺病毒载体和腺相关病毒载体。同时由于其易维护和稳健性，快速生长的细胞系及其衍生物通常应用于生物技术，例如生物制药的重组抗体表达以及细胞生物学研究。

（数据来源Hu J, et al. Cells Tissues Organs. 2018）

HEK293细胞系列：

HEK有多种衍生细胞系，每种细胞系在某些方面彼此不同：

l HEK293T：表达SV40T抗原基因，进而导致表达载体的扩增，最终增加感兴趣的基因表达。

l HEK293F：是一种HEK293野生型株，在无血清培养基中快速生长，具有高水平的蛋白表达。

l HEK293E：表达EBNA1，EBNA1能够促进游离DNA的核转移，从而提高增强子活性促进蛋白产生。

l HEK293-6E：一种新的293E细胞系，表达截断的EBNA1，结合无血清培养体系进行蛋白或病毒载体生产。

l HEK293FT：用pCMVSPORT6TAg转化293F细胞，用于生产慢病毒载体。

l HEK293H：来源于表达E1A腺病毒基因的HEK293细胞，用于空斑块分析和其他锚定依赖应用。

l HEK293S：293S细胞适合低Ca²⁺培养基悬浮生长和培养。随后，对293S细胞进行甲烷磺酸诱变和蓖麻毒素选择修饰，整合pcDNA6/TR质粒，产生293SG；然后用pcDNA3.1-zeo-STendoT质粒对293SG细胞进行转化，生成293SGGD细胞，用于糖工程修饰蛋白表达。

HEK293优势：

l 快速倍增时间（约36小时）；

l 易于培养；

l 可以作为增殖的粘附或悬浮液生长；

l 高再现性和一般一致性；

l 产生大量重组蛋白，尤其是那些在含有CMV启动子的质粒载体中的蛋白；

l 瞬态和稳定的基因表达；

l 通过使用物理和化学方法易于转染；

HEK293局限性：

l 细菌污染的危险可能会导致基因表达出现问题，并有可能失去细胞活力；

l 特别容易受到病毒污染；

l 其培养期的长短会对细胞的健康产生负面影响；

HEK293应用方向：

HEK293及其子细胞系在生物技术和研究中的应用非常普遍且用途广泛，概述如下：

l 受体信号：HEK293可用于细胞膜受体和离子通道的异源表达，以及G蛋白偶联受体信号通路的研究。

l 蛋白质生产：HEK293可大规模生产重组蛋白，可用于制造生物治疗性蛋白和疫苗。

l 癌症研究：HEK293具有致瘤性，适用于检测癌症治疗效果。

l 基因表达实验宿主：HEK293细胞常用于基因转染，检测表达蛋白，是诱导型RNA干扰系统研究中常用的方法。

l 病毒载体的繁殖：在病毒学中，HEK293可作为病原体的替代品，因为它们的危险性较低。