凡是来个根治标本分子分型里十有八九都有个p53突变型。那免疫组化p53到底怎么看，怎样才算突变？N个病理医生N个结果，一脸迷茫
p53免疫组化被广泛用于病理诊断中并常替代TP53基因检测，其对病理诊断及预后的评估都有重要的作用。
Tumor protein P53是TP53基因编码的蛋白质，也称p53，p53被称为“基因守护者”通过与DNA结合抑制基因突变来维持基因组稳定性。因此TP53是肿瘤抑制基因，TP53突变与多种肿瘤发生相关。正常的P53蛋白结构 
（p53蛋白四聚体形成域的结构） -反式激活结构域（transactivation domain）：氨基酸1-42的N端部分构成。-富含脯氨酸结构域（proline-rich domain）：从氨基酸63-97（各参考文献数值有些许出入），被证明是p53依赖的凋亡和细胞周期阻滞所必需的。-DNA结合结构域（DNA-binding domain，DBD）: 富含精氨酸，与转录活性相关。-四聚化相关结构域（tetramerization domain）-C端包含一个核定位信号（NLS）和一个核输出信号（NES）。NLS参与了p53入核，入核后的p53才能结合DNA并发挥其肿瘤抑制功能。在肿瘤中，p53失活突变多发生在DBD中，突变破坏p53与其靶DNA序列的结合能力，从而阻滞靶基因的转录激活，是 loss-of-function 突变。其他特殊功能异常发生取决于TP53基因突变的类型和位置。--p53正常/野生型（abnormal or wild type pattern)：低-中等不均匀的核阳性（2020妇科USCAP会议中建议使用“正常”，“野生型”更多用于果蝇遗传学上）
--p53异常过表达（p53 abnormal overexpression, OE）：通常是TP53 的错义突变，突变位点通常在DBD的中心位置
--p53异常完全缺失（p53 abnormal complete absence, CA）：通常是TP53发生无义、移码、剪接或缺失突变，导致p53免疫组化所用抗体无法识别的突变p53的抗原表位，表现为IHC阴性
--p53异常胞浆着色（p53 abnormal cytoplasmic pattern, CY）：伴或不伴核染色。近几年妇科上皮性肿瘤中见研究报道，是TP53核定位域(即前文介绍的NLS)(氨基酸300 - 325)发生突变，使得p53无法入核发挥功能。
--p53异常基底过表达（p53 abnormal basal overexpression）：罕见。目前在外阴鳞状病变的文献中见少量研究报道。文献中将>80%基底细胞核均匀强染色，没有明显的旁基底细胞着色，判定为基底过表达。（原因机制并未见阐述，有待更多的研究数据；不知道食管有没有这种突变模式 ）
排除人为因素，如组织固定是否充分、制片结果是否可靠等建议在扁桃体中，>40%的生发中心细胞染色强度不同，包括偶见强染色的细胞。扁桃体鳞状上皮在基底/基底旁区域也应显示不同强度的散在染色。
---内对照可以看周围正常组织是不是这种强弱不等的正常表达模式-每个系统都有自己的一套（但都没有官方版本，查到的文献有限有兴趣的小伙伴可以深度扒拉下）（亦有学者在467例胃癌标本中通过对p53免疫组化全切片中的表达强弱及百分比等（见下图），与P53基因检测结果比较，发现几种p53免疫染色不能用于预测TP53突变。）
（文献中胃癌p53免疫组化几种表达模式）
-目前妇科上皮性肿瘤免疫组化p53判读模式的研究较成熟：多将80%作为临界点
（文献中子宫内膜癌p53免疫组化判读流程图） 值得注意的是：目前市面上现有的p53免疫组化品种繁多，DO-7、DO-1、PAb1801及E26等都是针对靠近N端表位。如果蛋白被更远端截断导致表达的蛋白失去远端C端表位，就不会产生N端P53抗体的空染色模式。这种突变会导致P53 C端抗体的无效染色模式。是否需要使用C端P53抗体的免疫组化去验证，目前仅见有该类抗体的报道但还没有用于与TP53突变类型相关或预测。所以在我们的报告中按实际看到的报个强弱表达程度、着色位置及百分比（如80%核弥漫强阳，p53异常过表达），给临床一个倾向的p53突变结果是否会更客观些？ 当然免疫组化的结果也并不是绝对的，实际应用中又有很多问题（正常表达就一定没突变嚒？是不是一定要有那么严格的百分比？同一张切片上多种表达模式又该怎么算？启动分子流程的时机又是什么？） 看完之后，反正我学废了，不知道您废了没 - Toshimichi Tanaka Masahiko Watanabe and Keishi Yamashita. Potential therapeutic targets of TP53 gene in the context of its classically canonical functions and its latest non-canonical functions in human cancer[J]. Oncotarget, 2018, 9, (22): 16234-16247.
- Basile Tessier-Cloutier, Kim E.Kortekaas, Emily Thompson，et al. Major p53 immunohistochemical patterns in in situ and invasive squamous cell carcinomas of the vulva and correlation with TP53 mutation status[J]. Modern Pathology, 2020，33:1595–1605.
- Martin Köbel , Eun Young Kang. The Many Uses of p53 Immunohistochemistry in Gynecological Pathology: Proceedings of the ISGyP Companion Society Session at the 2020 USCAP Annual Meeting[J]. Int J Gynecol Pathol, 2021 Jan;40(1):32-40.
Martin Köbel ,Brigitte M. Ronnett, Naveena Singh , et al. Interpretation of P53 Immunohistochemistry in Endometrial Carcinomas: Toward Increased Reproducibility[J].Int J Gynecol Pathol,2019 Jan;38 Suppl 1(Iss 1 Suppl 1):S123-S131. - Joseph T. Rabban , M PH, KarunaGarg, Nicholas R, et al. Cytoplasmic Pattern p53 Immunoexpression in Pelvic and Endometrial Carcinomas With TP53 Mutation Involving Nuclear Localization Domains An Uncommon But Potential Diagnostic Pitfall With Clinical Implications[J]. Am J Surg Pathol,2021,45(11):1441-1451.
Isabelle Schoop, Saffiyeh Saboor Maleki, Hans-Michael Behrens,et al. p53 immunostaining cannot be used to predict TP53 mutations in gastric cancer: results from a large Central European cohort[J]. Hum Pathol. 2020 Nov;105:53-66.
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