【原】图解流式 | 1.流式通道之散射光通道

流式细胞术（Flow Cytometry，FCM），顾名思义，其研究对象是“流动的细胞”，这里面的“细胞”其实可以代表广义的“生物微粒”，如细胞、细菌、微球、小型模式生物等。因此，FCM实际上是对上述生物微粒进行快速定量分析和分选的技术。在医科研和临床实践中均有广泛应用。

今天，我们先来解读一下FCM中最基础的概念：流式通道，这将是我们后续解读FCM相关图形的基础。

大家是否想过，单细胞悬液单列通过流式细胞仪式，仪器是如何判断不同细胞的特性呢？想回答这个问题，我们必须得理解“流式通道”，其可分为散射光通道和荧光通道，散射光通道又包括2个通道（前向角散射 [forward scatter, FSC]，侧向角散射[side scatter, SSC]），荧光通道的数量与流式细胞仪的型号有关。

那么，FSC和SSC分别代表一个细胞的什么特征呢？

我们先说结论：FSC代表细胞的大小，SSC代表细胞的颗粒度（具体包括 细胞形状的规则程度，细胞表面的突起数量，细胞内的细胞器或者颗粒性物质数量）。

图1. FSC与SSC探测示意图

下面我们一起来解释一下上述结论：

（1）FSC代表细胞的大小

图2.散射光信号——前向角散射光FSC示意图

上面两幅图分别对应激光束在经过小细胞和大细胞时发生散射，被FSC探测器检测到（划重点：只有散射光可以被FSC检测器，原激光会被FSC探测器前方的过滤挡板过滤，因而不能被FSC探测器检测到）。可以发现：细胞的体积越大，可以向前方散射的光线就越多，FSC的信号就越强。

（2）SSC代表细胞的颗粒度

图3. 散射光信号——测向角散射光SSC示意图

上面两幅图分别对应激光束在经过颗粒度小和颗粒度大的细胞时发生散射，被SSC探测器检测到。可以发现：细胞的颗粒度越大，可以向侧方散射的光线就越多，SSC的信号就越强。