植物组织培养实验室与其他实验室的主要区别是要求无菌操作,避免微生物及其他有害因素的影响。植物组织培养实验室的面积大小和装备取决于两个因素:一是实验性质和研究内容,二是能承受的经费能力。然而,一个标准的植物组织培养实验室必须具备下列条件: ①清洗和储存玻璃器皿、塑料器皿和其他实验器皿; ②培养基的配制、灭菌和储存; ③植物材料的无菌操作; ④可控温度、光照、湿度等条件,以便对材料进行体外培养;⑤培养物生长发育过程的显微观察。 因此,植物组织培养实验室至少需要有三间相连但相互隔开的房间:第一间用于玻璃器皿的清洗和储存,以及培养基的制备(称为培养基室);第二间用于无菌操作(称为接种室);第三间用于放置培养物(称为培养室)。此外,如果条件许可,应配备能进行组织和细胞生长显微观察的细胞学实验室。 功能:完成各种器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等。 设备:水池、高压灭菌锅、超声波清洗器、干燥灭菌器(如烘箱)、酸度计等。 设计要求:10㎡左右;有电源、自来水和水槽;地面防滑、耐湿、排水性良好,易于清洁。
功能:进行一切与实验有关的准备工作:完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、器皿洗涤、培养基配制与分装、培养基和培养器皿的灭菌、培养材料的预处理等。 设备:药品柜、冰箱、天平、防尘橱(放置培养容器)、蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配制用玻璃仪器等。 设计要求:10~20㎡左右;房间宽敞、明亮,通风、干燥,便于多人操作;有电源、自来水和水槽,上下水畅通。
功能:主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序,是植物离体培养研究或生产中最关键的一步。 设备:紫外灯、空调、冰箱、双人超净工作台和整套灭菌接种仪器、药品等。 设计要求:5~10㎡左右;房间宽敞、明亮,通风、干燥;墙壁和地面防潮、耐高温;有电源、自来水和水槽,上下水畅通;通风措施良好;设计净化等级为十万级
功能:进入无菌室前的一个缓冲场地,减少人体从外界带入的尘埃等污染物。工作人员在此换上工作服、拖鞋,戴上口罩,才可以进入无菌室和培养室。进入无菌操作室前在此更衣换鞋,以减少进出时带入接种室杂菌。 设备:1~2盏紫外灯、水槽、实验台、鞋帽架、柜子、灭菌后的工作服、拖鞋、口罩。 要求:2~3㎡。为便于观察和参观,中间最好与接种室用玻璃墙隔离
功能:对接种到培养瓶等器皿中的植物离体材料进行控制条件下的培养,无论是研究性实验室还是生产性实验材料进行培养的场所。植物组织培养是在严格无菌的的条件下进行的,在无菌环境就需要一定的设备、器材和用具,同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。 设备:培养架(控温控光控湿)、摇床、转床、自动控时器、紫外灯、光照培养箱或人工气候箱、生化培养箱、除湿机、显微镜、温湿度计、空调等。 要求: 1) 培养室的大小可根据生产规模和培养架规格、数量和其他附属设备而定。不宜过大,面积10~20㎡,有缓冲间或走廊。一般设计成多个小的培养室 2) 能够控光控温(高温区和低温区),安装立式空调;可安装加湿器。培养室温度一般保持在(25±2)℃,光照强度1000~5000lx,光照时间8~26h/d,在实际工作中应根据不同的要求灵活掌握 3) 保持密闭、干爽、明亮,防止微生物感染。要求墙壁和地面光滑平整,绝热防火;地面用水磨石或瓷砖铺设。 4) 摆放培养架,以立体培养为主。培养架大多由金属制成,一般设5层,最低一层离地高约lOcm,其他每层间隔30cm左右,培养架即高1.7m左右。培养架长度都是根据日光灯的长度而设计,如采用40W日光灯,则长I.3m,30W的长lm,宽度一般为60cm。 5) 培养室内应设有摇床,以便进行液体悬浮培养。摇床可以是平动式的,也可以是旋转式的。 6) 培养室用电量大,应设置专用供电和配电设备。
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