乳酸脱氢酶(LDH)是一种氧化还原酶,催化丙酮酸盐和乳酸盐的相互转化,同时催化NADH和NAD+的相互转化。LDH是一种稳定的酶,存在于所有细胞类型中,并在质膜受损时快速释放到细胞培养基中。因此,LDH是细胞毒性研究中应用非常广泛的标记。LDH细胞毒性测定试剂盒为细胞毒性研究提供了一种简单易行的比色测定方法。该测定基于在典型的细胞毒性测定中,用细胞毒性化学试剂或细胞毒性细胞(NK细胞、细胞毒性T细胞)培养靶细胞以诱导靶细胞死亡和LDH释放。将含有LDH的上清液转移到新的96孔测定板的孔中,并与LDH反应溶液混合。在LDH的作用下,NADH与四氮唑盐MTT反应产生还原形式的NAD+和MTT。MTTex的还原形式在565nm处抑制最大吸收。生成的颜色的强度与裂解的细胞数直接相关。在室温下孵育30分钟后,使用平板读取器读取565nm处的吸光度。 细胞毒性检测试剂盒(乳酸脱氢酶法): Cat #: D-AKK1030 Size: 480T Storage: Stored at -20°C for 6 months 细胞毒性检测试剂盒(乳酸脱氢酶法)供应材料和储存条件: 试剂准备: 测定缓冲液:供应时即用。使用前将其平衡至室温。在4°C下储存。乳酸溶液:供应即用。使用前与室温相等。储存温度为4℃。 MTT溶液:随附即用。在化验过程中,保持在冰上避光。等分试样,以便您有足够的体积进行所需数量的分析。将等分试样储存在20℃的温度下。 PES解决方案:随附即用。在化验过程中保持冰冻状态。等分,以便您有足够的体积进行所需数量的分析。将等分试样储存在20°C的温度下。 LDH阳性对照:供应即用。在化验过程中保持冰冻状态。等分试样,以便您有足够的体积进行所需数量的分析。将等分试样储存在20℃的温度下。 NAD+解决方案:随附即用。在化验过程中保持冰冻状态。等分,以便您有足够的体积进行所需数量的分析。将等分试样储存在20°C温度下。 Triton X-100(10%):随附随用。使用前将其平衡至室温。储存温度为4℃。 LDH反应溶液:通过混合3.7mL测定缓冲液、1.4mL MTT溶液、800μL NAD+溶液、100μL PES溶液和4.0mL乳酸溶液,制备10mL足以在一个96孔板上使用的LDH反应溶液。建议重新配制。 |
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