亚胺培南联合磷霉素对多重耐药鲍曼不动杆菌的试验研究

在医院感染的众多病原菌中，多重耐药鲍曼不动杆菌（MDR-AB）是一类极具挑战性的 “劲敌”。它常常在免疫功能低下和危重患者中引发感染，给临床治疗带来极大的困难。随着抗菌药物的广泛使用，MDR-AB 的耐药问题愈发严重，可供选择的治疗药物十分有限。在此背景下，探索新的抗菌策略迫在眉睫。本研究聚焦于亚胺培南联合磷霉素对 MDR-AB 的抗菌作用，为临床治疗这类感染提供了重要的参考依据。

一、多重耐药鲍曼不动杆菌：临床治疗的 “难题”

鲍曼不动杆菌作为革兰阴性的机会性致病菌，是医院感染的常见病原菌之一。近年来，MDR-AB 感染的发生率呈上升趋势，这使得临床治疗面临着巨大的挑战。由于其对多种抗菌药物耐药，传统的单一药物治疗往往效果不佳，患者的治疗周期延长，死亡率也显著增加。

碳青霉烯类药物曾是治疗耐多药革兰阴性杆菌感染的一线药物，但随着 MDR-AB 对其耐药性的不断增加，临床治疗变得愈发棘手。根据 2021 年 CHINET 中国细菌耐药监测结果，耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌对亚胺培南（IMP）的耐药率高达 99.5%，这一数据凸显了寻找新治疗方案的紧迫性。

二、研究目的：探寻联合抗菌新方案

本研究旨在探索以亚胺培南为基础用药，联合磷霉素（FOS）对临床分离的 MDR-AB 的体内外抗菌方法。研究人员期望通过联合用药，发挥两种药物的协同作用，提高对 MDR-AB 的抗菌效果，为临床治疗提供更有效的方案。

三、研究方法：多维度探究联合用药效果

（一）材料准备

研究中使用的亚胺培南、磷霉素钠等试剂均购自专业公司，MH 琼脂及肉汤等也有可靠的来源。同时，研究选用了临床分离的 7 株 MDR-AB 以及药敏质控菌株，为实验提供了准确的研究对象。此外，实验还使用了大蜡螟作为动物模型，用于体内抗菌药物敏感试验。

（二）实验方法

1. 菌株鉴定与药敏试验
   ：研究人员运用 VITEK2Compact 细菌鉴定仪以及飞行时间质谱系统对菌株进行鉴定，并通过 K-B 纸片法检测耐药性，确保实验菌株的准确性和可靠性。采用微量肉汤稀释法测定单药最低抑菌浓度（MIC），再用微量棋盘法测定联合 MIC 并计算部分抑菌浓度指数（FICI），以此来评估联合用药的协同效应。
   
   
2. 时间杀菌曲线测定
   ：选取特定菌株，制备菌悬液后与药物共孵育，在不同时间点取样进行菌落计数，构建杀菌曲线，判断联合用药的杀菌效果。
   
   
3. 生物膜相关测定
   ：利用结晶紫染色法半定量生物膜，通过激光共聚焦显微镜观察生物膜内细菌活力，探究联合用药对生物膜形成和结构的影响。
   
   
4. 细菌 ROS 水平检测
   ：使用流式细胞仪检测亚胺培南及磷霉素单药与联合用药对细菌活性氧（ROS）表达的影响，从细胞层面揭示联合用药的杀菌机制。
   
   
5. 大蜡螟模型构建
   ：进行大蜡螟毒力检测试验，确定感染菌液浓度，然后构建大蜡螟体内抗菌药物敏感试验模型，观察联合用药对感染幼虫生存率的影响。
   
   

四、研究结果：联合用药的显著优势

（一）联合用药的协同效应

研究结果令人振奋，亚胺培南联合磷霉素对 5 株 MDR-AB 具有协同作用，对另外两株为相加作用，且联合用药的协同率高于其他组合。这表明联合使用这两种药物能够显著增强对 MDR-AB 的抑制效果。

（二）杀菌效果显著

时间杀菌曲线显示，亚胺培南联合磷霉素对菌株 AB6624、AB0153 分别在 4、8h 的菌落数较单药组降低 > 2log10CFU/mL，在 24h 时联合处理组的细菌菌落数较初始接种量降低 > 3log10CFU/mL，展现出强大的杀菌效应。

（三）对生物膜的抑制与破坏作用

通过结晶紫染色法和激光共聚焦显微镜观察发现，联合用药能够显著抑制菌株生物膜的形成，并对菌株 AB0153 的生物膜结构具有破坏作用，减少生物膜内的活菌数量，有效削弱了细菌的耐药机制。

（四）提高细菌胞内 ROS 水平

流式细胞仪检测结果表明，亚胺培南联合磷霉素可以提高菌株 AB0153 胞内 ROS 水平，且差异具有统计学意义。这意味着联合用药可能通过促进 ROS 的产生，损伤细菌的 DNA、蛋白质及脂质，从而发挥杀菌作用。

（五）提高大蜡螟生存率

在大蜡螟感染模型试验中，亚胺培南联合磷霉素处理组大蜡螟生存率提高，中位生存时间达到 96h，差异具有统计学意义，进一步验证了联合用药在体内的抗菌效果。

五、讨论：联合用药的价值与意义

本研究结果表明，亚胺培南联合磷霉素对 MDR-AB 具有显著的协同作用，这一联合用药方案展现出多方面的优势。

从作用机制来看，生物膜形成是细菌的重要耐药机制之一，细菌躲在生物膜内可以逃避机体免疫应答，阻碍抗菌药物发挥作用。而磷霉素联合亚胺培南能够穿透并抑制生物膜形成，破坏生物膜结构，使细菌更容易受到药物的攻击。同时，联合用药提高了细菌内 ROS 水平，通过 ROS 介导的细胞损伤，增强了杀菌效果。

在临床应用方面，这一联合用药方案为治疗 MDR-AB 感染提供了新的选择。目前临床治疗 MDR-AB 感染的药物有限，亚胺培南联合磷霉素的协同作用为临床医生提供了更有效的治疗手段，有望提高患者的治愈率，降低死亡率。

然而，本研究也存在一定的局限性。体外实验与体内实际情况可能存在差异，大蜡螟模型虽然能够在一定程度上模拟体内感染，但与人体感染仍有不同。未来还需要进一步开展临床研究，验证这一联合用药方案在人体中的有效性和安全性。

六、结语：联合用药的前景展望

亚胺培南联合磷霉素对 MDR-AB 具有协同作用，通过抑制生物膜形成及提高细菌胞内 ROS 水平发挥抗菌作用，为临床治疗 MDR-AB 感染提供了有力的证据。尽管目前仍面临一些挑战，但随着研究的不断深入，这一联合用药方案有望在临床实践中得到广泛应用，为更多患者带来希望。

参考文献：王亚萍，郭普，汪华学。亚胺培南联合磷霉素对多重耐药鲍曼不动杆菌的试验研究 [J]. 中国感染控制杂志，2023,22 (1):74-79.

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