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在生物化学与分子生物学实验中，溶液pH值的微小波动都可能影响实验结果的准确性。作为一款高效的生物缓冲剂，3-[N,N-二(羟乙基)氨基]-2-羟基丙磺酸（DIPSO）凭借其独特的化学性质和广泛的应用场景，成为色谱分离与电泳技术中不可或缺的稳定剂。本文将从其分子特性、技术原理及实际应用出发，解析DIPSO如何为实验提供精准的pH调控支持。 一、分子特性：双羟乙基氨基的缓冲优势 DIPSO的分子结构中包含两个羟乙基氨基和一个磺酸基团，这种偶极离子特性使其在pH 7.0至8.2范围内具备优异的缓冲能力。其pKa值（25℃下为7.4-7.8）接近生理环境，能够快速响应外界酸碱变化，维持溶液pH值的动态平衡。 此外，DIPSO的化学惰性使其几乎不溶于有机溶剂，这一特性在色谱分离中尤为重要。当用于蛋白质纯化时，DIPSO既能避免与目标分子发生非特异性结合，又能通过调节流动相pH值优化分离效果。 二、色谱分离：精准调控pH，提升分离效率 在色谱技术中，pH值直接影响目标分子的电离状态和固定相的表面电荷，进而决定分离效果。DIPSO的缓冲能力使其成为蛋白质、核酸等生物大分子分离的理想选择。例如，在离子交换色谱中，通过调节DIPSO缓冲液的pH值，可控制目标分子的净电荷，实现不同等电点蛋白质的梯度洗脱。 三、电泳技术：稳定pH梯度，保障迁移准确性 电泳实验中，溶液pH值直接影响带电分子的迁移速率和方向。DIPSO的缓冲能力可确保电泳过程中pH值的恒定，避免因电流产生的焦耳热导致的局部pH变化。例如，在聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）中，DIPSO缓冲液可维持凝胶孔径的稳定性，确保蛋白质分子按分子量大小精确分离。实验对比显示，使用DIPSO缓冲体系时，蛋白质条带的迁移距离误差可控制在±1%以内。 在等电聚焦电泳（IEF）中，DIPSO的宽pH缓冲范围（7.0-8.2）可覆盖多数蛋白质的等电点区域，实现高分辨率分离。其低离子强度特性还能减少电场畸变，进一步提升分离效果。例如，在临床诊断中，DIPSO缓冲液已被用于血清蛋白的等电聚焦分析，帮助医生准确鉴别异常蛋白峰。 |
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