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| 共 4 篇文章 |
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关于Touchdown PCR关于Touchdown PCR.对于使用简并引物或者含有错配碱基的的引物进行的TD-PCR，程序运行的调整包括降低退火温度范围（例如从50度降至35度），而在最后15个循环中采用50度或更高一些的退火温度（一旦扩增开始，引物会全部补充到新合成的复制子中，会有更高的Tm值，这时低的退火温度则不利于扩增）。hot start PCR 热启动PCR是... 阅3423 转46 评0 公众公开 10-06-05 23:24 |
PCR注意事项 1．5．1 PCR的操作注意事项◆模板： PCR所用的模板一般稀释至纳克数量级，并保存于-20。酵母 1~10ng细菌 10ng~100ng质粒 0.1ng~10ng◆引物：标准PCR反应（不限制引物数量）每条引物的典型浓度时0.1~0.5umol/L（即6*1012~3*1013个分子）。该浓度扩增1kbDNA片段少于30个循环的PCR反应绰绰有余，... 阅4110 转49 评0 公众公开 10-06-05 21:04 |
PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带？PCR体系是10ul的，每次PCR完了以后，管壁上有一层水气，需不需要覆盖矿务油？PCR加样孔上有很亮的条带，但没有产物条带？PCR的产量有许多因素决定他们的主次关系是什么,各因素又是怎么调节的？PCR产物大约有900bP，哪种测序方法比较好？直接用纯化的PCR产物测序还是克隆到T载体上再测序？纯化PCR产物... 阅1078 转18 评0 公众公开 10-06-05 21:03 |
PCR产物电泳时间及结果分析pCR产物的电泳检测时间PCR产物电泳时间及结果分析pCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。引物：引物质量、引物的浓度、两条引物的浓度是否对称，是pCR失败或扩增条带不 理想、容易弥散的常见原因。Mg2+浓度：Mg2+离子浓度对pCR扩增效率影响很大，浓度过高... 阅1348 转53 评0 公众公开 10-06-05 20:44 |
