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抗体与细胞裂解液或表达上清中相应的蛋白结合后，再与蛋白 A／G（Protein A／G）或二抗偶联的agaose或Sepharose珠子孵育，通过离心得到珠子－蛋白A／G或二抗－抗体－目的蛋白复合物，沉淀经洗涤后，重悬于电泳上样缓冲液，煮沸5－10 min，在高温及还原剂的作用下，抗原与抗体解离，离心收集上清，上清中包括抗体、目的蛋白和少量的杂蛋白。用封... 阅8410 转132 评0 公众公开 10-02-20 13:34 |
浓度及浓度单位换算 1ppm=1000ppb1ppb=1000pptppm即：mg/L（毫克/升）ppb即：ug/L（微克/升）ppt即：ng/L（纳克/升）（一）、溶液的浓度。溶液浓度可分为质量浓度（如质量百分浓度）和体积浓度（如摩尔浓度、当量浓度）和体积浓度三类。溶液的浓度用溶质的质量占全部溶液质量的百分率表示的叫质量百分浓度，用符号%表示。用单位体积（1立方米或... 阅7954 转73 评0 公众公开 09-11-29 16:22 |
蛋白质印迹（Western blotting）方法原理和优化(3)_绿谷生物网蛋白质印迹（Western blotting）方法原理和优化(3)Update:2008-07-22From:ibioo.Com Hot:671.印迹膜干燥后就变得不透明了，这种光学变化是一种表面现象，可以掩盖截留在深部孔中的水分，应按照推荐时间干燥印迹膜，以确保所有液体从膜的孔结构中蒸发出来。该方法基于一种假设，即转... 阅681 转14 评0 公众公开 09-11-27 20:38 |
蛋白质印迹（Western blotting）方法原理和优化(2)_绿谷生物网蛋白质印迹（Western blotting）方法原理和优化(2)Update:2008-07-22From:ibioo.Com Hot:670.这种方法可用于将蛋白质从一块凝胶上转移到多个膜上，同一凝胶可得到几个印迹膜。三种缓冲液是：?? 阳极缓冲液Ⅰ：0.3M Tris, PH 10.4?? 阳极缓冲液Ⅱ：25mM Tris, PH 10.4?? 阴极缓冲液... 阅1073 转23 评0 公众公开 09-11-27 20:37 |
SDS-PAGE电泳时电泳条带不规则等几点问题_绿谷生物网SDS-PAGE电泳时电泳条带不规则等几点问题Update:2009-03-15From:ibioo.Com Hot:607.1). 电泳中，只有在恒压的条件下电泳期间蛋白质才可以保持恒定的迁移速率。因此，要确保上下电泳槽中的电泳液与凝胶保持良好的接触。7). 制样过程中，如果样品混合物变为黄色，说明溶液太酸，应加入NaOH调至... 阅2296 转29 评0 公众公开 09-11-27 20:35 |
SDS-PAGE蛋白胶银染注意事项_绿谷生物网SDS-PAGE蛋白胶银染注意事项Update:2009-03-15From:ibioo.Com Hot:421.2. 对于考马斯亮蓝染色的胶，可用甲醇将胶漂洗后，继续进行银染。3. 不同蛋白质对银染的反应是不一样的，尤其是碱性蛋白染色效果差。7. 如果染色后有呈灰尘或烟雾状灰色或棕色的沉淀出现在凝胶表面，可能是在几步漂洗过程中洗得不够... 阅2578 转37 评0 公众公开 09-11-27 20:34 |
考马斯亮蓝染色中G250与R250的区别_绿谷生物网考马斯亮蓝染色中G250与R250的区别Update:2009-03-15From:ibioo.Com Hot:594.G250, 又名Xylene brilliant cyaninG.比考马斯亮蓝R250多二个甲基.MW=854; max=590―610nm.染色灵敏度不如R250,但比氨基黑高3倍.优点在于它在三氯乙酸中不溶而成胶体,能选择地染色蛋白而几乎无本底色.所以常用于需要重复... 阅951 转7 评0 公众公开 09-11-27 20:34 |
SDS-PAGE胶浓度与对蛋白的分辨率对应图_绿谷生物网SDS-PAGE胶浓度与对蛋白的分辨率对应图Update:2009-03-15From:ibioo.Com Hot:688. 阅5710 转16 评0 公众公开 09-11-27 20:32 |
考马斯亮兰法（Bradford法）测定蛋白浓度_绿谷生物网考马斯亮兰法（Bradford法）测定蛋白浓度Update:2009-11-04From:ibioo.Com Hot:131.2. 微量法当样品中蛋白质浓度较稀时（10－100mg/ml）,可将取样量（包括补加的水）加大到0.5ml或1.0ml, 空白对照则分别为0.5ml或1.0ml H2O, 考马斯亮蓝G－250试剂仍加5.0ml, 同时作相应的标准曲线，测定595nm... 阅2172 转37 评0 公众公开 09-11-27 20:31 |
蛋白质印迹（Western blotting）方法原理和优化_绿谷生物网。Western印迹Western印迹含一系列步骤，包括：?? 用聚丙烯酰胺凝胶分离蛋白样品。用1-D或2-D凝胶分离复杂蛋白质混合物印迹前分离复杂蛋白质混合物的最常见方法是一维（1-D）SDS-PAGE电泳，它根据蛋白质的分子量进行分离。例如：4-12%Tris-glycine凝胶适合于 30-200KD蛋白质的分离，而... 阅1282 转27 评0 公众公开 09-11-27 20:19 |
