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[原]基因表达检测：RNA抽提 基因表达检测：RNA抽提。4、 乙醇清洗： 弃上清， 加入 1ml 75%乙醇洗涤一次， 4°C 离心 7500 g×5minP.S. 加入 75%乙醇时让 RNA 沉淀轻轻漂起来，或者保持原位，因为有时候RNA 太少，吹散了再离心下来时 RNA 碎片不一定能聚集到一起形成肉眼可见的沉淀，导致后面的“盲操作”。RNA质量检测。将样品加上RNA loading buffer 后加入上样... 阅776 转7 评0 公众公开 20-04-11 11:33 |
基因表达检测：PCR引物设计。引物设计流程：找到目的基因CDs序列的保守区域->用软件设计引物->用软件评价引物->Blast引物特异性。设计引物：OLIGO ->Change ->Current Oligo Length 修改引物长度 ->Tm框里搜索合适的引物，用Upper和Lower选定。Tm值：在72℃左右，上下游引物的Tm值保持一致——选择合适的位置，设置合适的引... 阅587 转7 评0 公众公开 20-04-10 14:49 |
[原]基因表达检测：rtPCR 基因表达检测：rtPCR.rtPCR技术是先提取出RNA，然后将RNA反转录为与其互补的cDNA，接下来加好各种待反应物在PCR程序下反应，经过PCR后，再通过跑电泳进行产物检测的过程。反转录：反转录是在反转录酶的作用下以RNA为模板合成DNA的过程，合成的DNA即为cDNA(complementary DNA)。PCR产物检测：琼脂糖凝胶电泳。电泳槽里装的电泳液是1X TAE溶液；... 阅4666 转14 评0 公众公开 20-04-09 16:07 |
