绪论: 一、名词解释: 微生物:一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。它们都是一些个体微小,构造简单的低等生物。 二、简答、论述: 1、为什么微生物一直不被人类所了解? 因为它们⑴个体过于微小;⑵群体外貌不显;⑶种间杂居混生;⑷其形态与其作用的后果之间很难被人认识。 2、微生物的五大共性: ⑴体积小,面积大;⑵吸收多,转化快;⑶生长旺,繁殖快;⑷适应强,易变异;⑸分布广,种类多。 3、巴斯德和科赫对微生物学的贡献: 巴斯德: ⑴彻底否定了“自生说”。(曲颈瓶实验) ⑵免疫学——预防接种。(鸡霍乱病) ⑶证明发酵是由微生物引起的。 ⑷发明巴氏消毒法。 科赫: ⑴证实炭疽病菌是炭疽病的病原菌。 ⑵发现了肺结核病的病原菌。 ⑶提出了科赫法则。(证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则) ⑷用固体培养基分离纯化微生物。 ⑸配制培养基。 原核生物: 一、名词解释: 原核生物:指一大类细胞核无核膜包裹,只存在称做核区的裸露DNA的原始单细胞生物,包括真细菌和古生菌两大类群。 细菌:是一类细胞细短、结构简单、胞壁坚韧、多以二分裂方式繁殖和水生性较强的原核生物。 糖被:是包被与某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的透明胶状物质。分为荚膜、微荚膜、粘液层和菌胶团。 芽孢:某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成的一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量低、抗逆性强的休眠构造,称为芽孢。 DPA-Ca:吡啶-1,6二羧酸钙盐的简称,芽孢皮层中的主要成分之一,可能与芽孢的抗逆性有关。 伴孢晶体:少数芽孢杆菌在形成芽孢的同时,会在芽孢旁形成一颗菱形、方形或不规则形的碱溶性蛋白质晶体,称为伴孢晶体。 菌落:将单个微生物细胞或一小堆同种细胞接种到固体培养基表面(有时在内层),当它占有一定的发展空间并处于适宜的培养条件下时,该细胞就会迅速生长繁殖并形成细胞堆,即菌落。 放线菌:一类主要呈丝状生长和以孢子繁殖的革兰氏阳性细菌。 蓝细菌:一类进化历史悠久、革兰氏染色阴性、无鞭毛、含叶绿素a(但不形成叶绿体)、能进行产氧性光合作用的大型原核生物。 支原体:一类无细胞壁、介于独立生活和细胞内寄生生活间的最小型原核生物。 二、简答、论述: 1、细菌细胞壁的功能: ⑴固定细胞外形和提高机械强度,使其免受渗透压等外力的伤害。 ⑵为细胞的生长、分裂和鞭毛运动所必须。 ⑶阻拦大分子有害物质进入细胞。 ⑷赋予细菌特定的抗原性以及对抗生素和噬菌体的敏感性。 2、磷壁酸的功能: ⑴通过分子上的大量负电荷浓缩细胞周围的Mg+,提高细胞膜上一些合成酶的活力。 贮藏元素。 ⑵调节细胞自溶素的活性,防止细胞因自溶而死亡。 ⑶作为噬菌体的特异性吸附受体。 ⑷赋予G+细菌特定的抗原。 ⑸增强某些致病菌对宿主细胞的粘连,避免白细胞吞噬。
3、G+细菌和G-细菌的区别: 比较项目 G+细菌 G-细菌 革兰氏染色反应 紫色 红色 肽聚糖层 厚,层次多 薄,一般单层 磷壁酸 多数含有 无 外膜 无 有 脂多糖 无 有 鞭毛结构 基体上着生两个环 基体上着生4个环 产毒素 外毒素为主 内毒素为主 对溶菌酶 敏感 不敏感 对青霉素,磺胺 敏感 不敏感 对链霉素,氯霉素,四环素 不敏感 敏感 产芽孢 有的产 不产 4、G+细菌和G-细菌细胞壁的区别: 性质 G+ G- 内壁层 外壁层 厚度(nm) 20-80 2-3 8 层次 单层 多层 肽聚糖结构 多层,交联度75%比较坚固 1-2层,交联度25%,亚单位交联网格较疏松 与细胞膜关系 不紧密 紧密 肽聚糖 占干重30%-95% 占干重5%-20% 磷壁酸 有 无 无 多糖 有 无 无 蛋白质 有或无 无 有 脂多糖 无 无 有 脂蛋白 无 有或无 有 青霉素反应 敏感 不够敏感
5、原核生物细胞壁的特殊结构: ⑴肽聚糖结构只出现于原核生物中,胞壁酸、磷壁酸、D-氨基酸以及二氨基庚二酸(m-DAP)都是细菌以及与细菌相近的原核生物细胞壁中特有的成分。 ⑵具有两种D-氨基酸(D-Ala和D-Glu),有助于抵抗普通蛋白酶和肽酶的分解作用。 7、革兰氏染色的机制: G+细菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交练致密,故遇脱色剂乙醇处理时,因失水而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇的处理不会溶出缝隙,因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内,使其保持紫色。 G-细菌细胞壁外膜中脂质含量很高,肽聚糖层,遇脱色剂乙醇时,以脂质为主的外膜迅速溶解,这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘的复合物的溶出,因此细胞褪成无色,这时再经沙黄等红色染料复染,就使G-细菌呈现红色,而G+细菌仍保持紫色。 8、细胞膜的生理功能: ⑴选择性的控制细胞内外营养物质和代谢产物的运送。 ⑵是维持细胞内正常渗透压的结构屏障。 ⑶是合成细胞壁和糖被有关成分的重要场所。 ⑷膜上含有与氧化磷酸化或光合磷酸化等能量代谢有关的酶系,是细胞的产能基地。 ⑸是鞭毛基体的着生部位。
13、细菌、酵母菌、放线菌、霉菌的菌落特征:
主要特征菌落 细菌 酵母菌 放线菌 霉菌 含水状态 很湿 较湿 较干燥 干燥 外观形态 小而突起或大而平坦 大而突起 小而紧密 大而疏松或大而致密 细胞相互关系 分散或有一定排列方式 单个分散或假丝状 丝状交织 丝状交织 形态特征 小而均匀,个别有芽孢 大而分化 细而均匀 粗而分化 参考特征 菌落透明度 透明或稍透明 稍透明 不透明 不透明 菌落与培养基结合程度 不结合 不结合 牢固结合 较牢固结合 菌落正反面颜色的差别 相同 相同 一般不同 一般不同 菌落边缘 一般看不到细胞 可见球状、卵圆状或假丝状细胞 有时可见细丝状细胞 可见粗丝状细胞 细胞生长速度 很快 较快 慢 较快 气味 臭味 酒香味 泥腥味 霉味
真核微生物: 一、名词解释: 真核生物:是一大类细胞核具有核膜,能进行有丝分裂,细胞质中存在线粒体或叶绿体等多种细胞器的生物。包含真菌、显微藻类和原核生物。 真菌:具细胞壁,无根茎叶分化,不含叶绿体,靠寄生或腐生方式生活的一类真核微生物,少数单细胞,大多数菌体呈丝状。 酵母菌:单细胞,以出芽方式繁殖,细胞壁常含甘露聚糖,常生活在含糖量教高、酸度较大的水生环境中的单细胞真核微生物。 霉菌:菌丝体较发达又不产生大型肉质子实体结构的真菌。 子实体:指在其里面或上面可产生无性或有性孢子,有一定形状和构造的任何菌丝体组织。 蕈菌:能形成大型肉质子实体的真菌,包括大多数担子菌类和极少数的子囊菌类。 二、简答、论述: 1、霉菌的代表种类: ⑴毛霉属:由无隔多核的菌丝构成菌丝体,产生无性的孢囊孢子和有性的接合孢子,蛛网状菌落。具有很强的分解蛋白质的能力。用于淀粉酶的生产,柠檬酸发酵。主要分布于土壤、肥料中。 ⑵根霉属:匍匐菌丝可分化出吸收营养的假根及产无性孢囊孢子的孢囊梗,有性繁殖产生接合孢子。产生淀粉酶、糖化酶,是酿酒工业的菌种。 ⑶曲霉属:有隔多核菌丝,具足细胞,经由菌丝分化成的分生孢子头产生无性的分生孢子,有的种有性繁殖产生子囊和子囊孢子。用于制酱、酿酒、制醋曲等。广泛分布在谷物、空气、土壤及各种有机物上。 ⑷青霉属:有隔多核菌丝体产生帚状分枝的分生孢子梗。产生青霉素。分布于发霉的水果上。
新陈代谢: 简答、论述: 1、肽聚糖生物合成的步骤: (一)在细胞质中的合成 由葡萄糖合成N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸 由N-乙酰胞壁酸合成(UDP-N-乙酰胞壁酸五肽) (二)在细胞膜上的合成 Park核苷酸聚合成肽聚糖单体。(杆菌肽和万古霉素可以阻断合成) (三)在细胞膜外的合成 肽聚糖单体组成肽聚糖。(青霉素是D-丙氨酰-D-丙氨酸的结构类似物) 生长及控制: 一、名词解释: 生长:当微生物体的同化作用的速度超过了异化作用时,其原生质的总量就不断增加,于是出现了个体细胞的生长。 繁殖:当生长达到一定程度后,会引起个体数目的增长,称为繁殖。 平板菌落计数法:把稀释后的一定量菌样通过浇注或涂布的方法,让其内的微生物单细胞一一分散在琼脂平面上,待培养后,每一活细胞就形成一个单菌落,此即菌落形成单位(cfu)。根据每皿上的cfu数乘上稀释度就可推算出菌样的含菌数。 同步生长:通过同步培养的手段而使细胞群体中各个体处于分裂步调一致的生长状态,称为同步生长。 生长曲线:定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的实验曲线。 生长限制因子:凡处于较低浓度范围内可影响生长速率和菌体产量的某营养物,就称生长限制因子。 连续培养:当微生物一单批培养的方式培养到指数期的后期时,一方面以一定速率连续留入新鲜培养基,通入无菌空气,另一方面,利用溢流的方式,以同样的流速不断流出培养物,于是容器内的培养物就可达到动态平衡,其中的微生物就可长期保持在指数期的平衡生长状态和恒定的生长速率上,于是形成了连续生长。 专性好氧菌:必须在较高浓度分子氧的条件下才能生长,它们有完整的呼吸链,以分子氧作为最终氢受体,具有SOD和过氧化氢酶。 兼性厌氧菌:以在有氧条件下的生长为主也可兼在厌氧条件下生长的微生物。 微好氧菌:只能在较低的氧分压下才能正常生长的微生物。也是通过呼吸链并以氧为最终氢受体而产能。 耐氧菌:可在分子氧存在下进行发酵性厌氧生活的厌氧菌。它们的生长不需要任何氧,但分子氧对它们也无害。 厌氧菌:一类严格的在无氧环境下生存的细菌,分子氧对它们有毒,即使短期接触也会抑制甚至致死,它们的细胞内缺乏SOD和细胞色素氧化酶,大多数还缺乏过氧化氢酶。 最低抑制浓度:是评定某化学药物药效强弱的标准,指在一定条件下,某化学药剂抑制特定微生物的最低浓度。 半致死量:是评定某药物毒性强弱的指标,指在一定条件下,某化学药剂能杀死50%实验动物时的剂量。 最低致死剂量:指在一定条件下,某化学药剂能引起实验动物群体100%死亡率的最低剂量。 表面消毒剂:对一切活细胞都有毒性,不能用作活细胞或肌体内治疗用的化学药剂。 石炭酸系数:指在一定时间内,被试药剂能杀死全部供试菌的最高稀释度与达到同效的石炭酸的最高稀释度之比。(10min,伤寒沙门氏菌) 抗代谢药物:是指一类在化学结构上与细胞内必要代谢物的结构相似,并可干扰正常代谢活动的化学物质。 抗生素:是一类由微生物或其他生物生命活动过程中合成的次生代谢产物或其人工衍生物,它们在很低浓度时就能抑制或干扰其他生物(包括病原菌、病毒、癌细胞等)的生命活动,因此可用作优良的化学治疗剂。 二、简答、论述: 1、微生物的典型生长曲线: (一)延滞期: 特点: ⑴生长速率为零; ⑵细胞形态变大或增长; ⑶细胞内的RNA尤其是rRNA含量增高,原生质呈嗜碱性; ⑷合成代谢十分活跃,核糖体、酶类和ATP的合成加速,易产生各种诱导酶; ⑸对外界不良条件反应敏感。 (二)指数期 特点: ⑴生长速率常数R最大,代时G最短; ⑵细胞进行平衡生长; ⑶酶系活跃,代谢旺盛。 三)稳定期:(R=0) 稳定期到来的原因: ⑴营养物质尤其是生长限制因子的耗尽; ⑵营养物的比例失调; ⑶酸、醇、毒素或H2O2等有害代谢产物的积累; ⑷pH、氧化还原势等物理化学条件越来越不适宜。 4、高温灭菌的种类: 烘箱内热空气灭菌法 巴氏消毒法(63°30min,72°15s) 湿热灭菌法: 常压下: 煮沸消毒法 间歇灭菌法 常规加压灭菌法 加压下: 连续加压灭菌法 5、为什么湿热灭菌法优于干热灭菌法: ⑴菌体在有水的情况下,蛋白质容易凝固,蛋白质含水量越高,凝固温度就越低; ⑵热蒸汽比热空气的穿透力强,能更加有效地杀灭微生物; ⑶蒸汽存在潜热,当气体转变成液体时,可放出大量热量。 6、抗代谢药物的作用: ⑴与正常代谢物一起共同竞争酶的活性中心,从而使微生物正常代谢所需的重要物质无法正常合成。(磺胺类) ⑵“假冒”正常代谢物,使微生物合成出无生理活性的假产物;(8-重氮鸟嘌呤) ⑶某些抗代谢药物与某一生化合成途径的终产物的结构类似,可通过反馈调节破坏正常代谢调节机制。(6-巯基腺嘌呤) 7、抗生素的作用原理: ⑴抑制细菌细胞壁合成;(青霉素) ⑵破坏细胞质膜;(多粘菌素) ⑶抑制蛋白质合成;(链霉素、四环素) ⑷抑制核酸合成。(利福霉素) |
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