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微生物检查包括：细菌、真菌、衣原体、支原体及病毒等。这对于查明致病原因和选择用药十分重要。但除细菌和真菌外，直接查找方法比较复杂。细菌培养，采集血、痰、咽试子、大便、小便、创面分泌物等标本进行培养，看有无致病菌生长，正常应为阴性或少量非致病菌；真菌检查，标本涂片或培养，检出真菌为不正常。 基础知识 1.什么是微生物?什么是病原微生物? 微生物是需借助光学显微镜或电-y：显微镜放大观察到的结构简单，个体微小的生物的总称。微生物的种类很多，医学微生物尤其是临床微生物主要有细菌、病毒、真菌、支原体、衣原体等。
微生物在自然界中广泛存在，与人类和自然界其他生物共生共存，绝大多数对人类和自然界是有益的，只有少部分可以引起人类和动植物发生疾病，这部分微生物才称为病原微生物，比如结核分枝杆菌可引起结核病，痢疾杆菌可以引起痢疾等。 2.什么是细菌?细菌分哪几种? 细菌是在自然界分布最广、个体数量最多的有机体，是大自然物质循环的主要参与者。其体积微小，以微米作为测量单位，无色半透明，只有经过染色才能观察到细菌的轮廓及其结构。经革兰染色，可将细菌分为两大类，即革兰阳性菌和革兰阴性菌。细菌主要由细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体等部分构成，有的细菌还有夹膜、鞭毛、菌毛等特殊结构。根据形状则可分为三类，即：球菌、杆菌和螺旋菌(包括弧形菌)。 3.什么是病毒?病毒分哪几种? 病毒是结构最简单、体积最微小(纳米)的一类非细胞型微生物，介于生命和非生命之间的一种物质形式，其必须严格寄生在活细胞内，含有单一种核酸即脱氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA)的基因组和蛋白质外壳，没有细胞结构，对抗生素不敏感，但对于干扰素敏感。按传播途径病毒可分为呼吸道病毒、胃肠道病毒、经性传播感染的病毒和狂犬病毒等。按感染部位与症状特征则分为肝炎病毒、出血热病毒、疱疹病毒、侵犯神经系统的病毒和肿瘤病毒等。 4.什么是真菌? 真菌是一大类具有细胞壁和典型细胞核，不含叶绿素，不分根、茎、叶的真核细胞型微生物。细胞核高度分化，有核膜和核仁，细胞内有完整的细胞器。 5.什么是支原体和衣原体? 支原体为没有细胞壁，呈高度多形态性，能通过滤器，可用人工培养基培养增殖的一类最小的原核细胞型微生物。由于这一类微生物没有细胞壁，能形成丝状与分支形状而称其为支原体。衣原体是一类专性细胞内寄生、有独特发育周期、能通过细菌滤器的原核细胞型微生物，多呈球状、堆状，有细胞壁。 6.人体内的正常茵群是指什么? 在人的皮肤表面体表、口腔、鼻咽、肠道等腔道黏膜中都存在着细菌，对人体无害甚至有益的细菌称为正常菌群，比如肠道菌群可以将不能吸收的食物残渣进行分解成为粪便排出体外，还可以制造维生索等对人体都有益处。 7.细菌检测和病毒检测，真菌检测各有哪些方法? 细菌可通过细菌形态结构、培养特性、生化反应、血清学试验等方法进行检测。
病毒的检测包括电子显微镜观察、抗原检测、核酸检测、病毒分离培养及抗体检测等途径。
真菌检测采用直接涂片法、培养法、免疫学试验及动物实验等方法。 8.支原体和衣原体检测有哪些方法? 衣原体检测可采用酶免法、直接免疫荧光法，核酸检测技术包括DNA探针法、聚合酶链式反应(PCR)、连接酶链式反应(LCR)等和细胞培养法等。支原体实验室检测方法有：形态学检查、支原体培养、抗原检测、血清学方法和分子生物学方法。 9.用于检测病原微生物的标本有哪些? 根据病人的症状，医生的初步考虑属于某个部位感染就留取此部位的样本进行细菌检查，常用于微生物检查的标本有血液、大便、痰、尿、脑脊液、胸水、腹水、关节液、各种拭子、各种分泌物、各种排泄物、各种穿刺液等。 检验项目及正常参考值 1．血液 1)涂片查疟原虫、利杜体：未见疟原虫、利杜体。 2)血培养：无细菌生长。 2．痰 1)涂片革兰染色：未见真菌及革兰阴性杆菌。 2)涂片抗酸染色(找结核菌)：未见抗酸杆菌(结核杆菌)。 3)痰培养：无致病菌生长。 3．尿 1)中段尿培养：无细菌生长。 2)24小时尿沉渣找结核菌：未见抗酸杆菌(结核杆菌)。 4．大便 1)大便培养：无致病菌生长；无志贺菌和沙门菌生长。 2)大便球杆菌比例：l:3～1:5。 5．脑脊液、胸腹水、关节液 1)涂片革兰染色：未见细菌。 2)涂片抗酸染色：未见抗酸杆菌。 3)脑脊液墨汁染色；未见新型隐球菌。 4)脑脊液、胸腹水、关节液培养：无细菌生长。 专家解读 1.为什么要做微生物检查7 根据不同的病情采集不同的标本进行涂片或培养的检测，从而得出是何种致病菌，并迸一步做药敏试验，从而得出哪些药物对此菌敏感，哪些药物耐药，进而按照药物敏感性进行有针对性的使用抗生素，避免盲目用药造成的经济上的损失以及延误病情所造成的严重后果。所以，只要发热怀疑有感染都应该进行细菌培养、涂片查细菌等有关微生物方面的检验。 2.什么标本要留于指定的容器中? 要找到患者的真正的致病菌，就要先排除外界环境中的微生物污染，医院指定的容器是经过高压灭菌的，是无菌的容器，将标本留于其中，得到的结果才是准确的结果。 3.为什么标本留取时有合格与不合格之分? 对于医学微生物学来说，检测的目的是找出真正的致病菌，对症用药，以使患者得到及时的治疗。因此标本留取是否合格直接影响着报告结果，所以要正确留取。 4.怎样正确留取痰液? 留取痰液时应该是留取清晨第一口痰，留痰前用清水漱口或刷牙，有义齿(假牙)者取下后漱口或刷牙，咳出深部痰，以黏性、脓性或血性为佳，白色泡沫痰一般为涎液，应弃之重新留取，痰液吐人专用无菌容器中。 5.什么叫中段尿培养? 中段尿培养是诊断尿路感染的重要依据，也是治疗时使用何种抗生索的依据，非常重要。但是在临床工作中，不少病人对如何留取中段尿的方法了解不够，尿液被污染，培养结果出现假阳性。正确的留取方法是：先将外阴部洗干净，用适合的消毒液消毒后再排尿，将刚开始的尿不要，到大约排出尿液l/3后，再用消毒的无菌的管子接尿，留取2～5ml即可，盖盖送检，注意不要用手摸 盖子与尿管内壁接触的部分，以确保尿液不被污染。 6.怎样留取粪便标本? 粪便培养必须留取有脓血或有黏液的部分，如果取的部位不当就培养不出致病菌。留取的大便必须放在指定消过毒的容器中，若是放在普通的未消毒的容器中，会被容器中的细菌污染，培养出的细菌不是真实的致病菌。有的将留取的大便标本放在普通纸盒内甚至放在纸上，都是不正确的。 7.为什么化脓性感染病灶中取脓汁培养阳性率反而较低？ 脓液是由坏死的组织和吞噬了细菌而死亡的白细胞组成，都是无任何营养的物质，而细菌一般都需要在有较高营养的环境中才能生存生长，因此，在脓液中几乎没有细菌，所以取脓液培养也就难以培养出阳性结果。 8.为什么培养的结果要3天甚至更久才能出结果? 微生物培养不是一时一会儿就可以完成的，它有其自身的生长周期。当标本送检后应及时接种到相应的培养基上，然后放置于温度、湿度恒定的孵箱中，孵育24～48小时后取出， 观察生长的细菌形状，并进行一些生化反应，从而鉴定出细菌名称。在这些生化反应中，有些是可以在几分钟之内看到结果，而大多数反应是要在24小时后才能得到结果。同时要对致病菌进行药敏试验，依然是要24小时出结果。因此最终的报告是要到第3天甚至是更久才能签发。 9.为什么痰既要做涂片又要做培养? 由于培养的过程需要耗费的时间较长，为了辅助临床做出快速的诊断，并合理的选用抗生素，可以先进行涂片，得到大体的细菌分类，如革兰阳性菌或者革兰阴性菌。根据此大致的结果，再结合临床的症状及其他检查，选用合适的药物。 10.痰涂片可队代替痰培养吗? 痰涂片只是一个大致的分类结果，并不能鉴定出是何种致病菌，更无法得到此菌对哪类的药物敏感，因此为了得到精确的结果，就要进行培养，从而得到鉴定和药敏的结果。 11.尿培养为什么出现污染就要重新留取尿标本? 如果患者是尿路感染的话，其致病菌应该是单一的，不会超过两种，所以当培养的结果出现三种甚至更多的时候，应考虑是否是标本污染，为了结果的准确性，建议患者重新留取标本送检以排除外界污染的影响。 12.血培养的培养时间为什么比痰培养的时间长? 血培养的时间一般为7～10天。正常人的血液中是没有细菌生长。当某些细菌入血后，其数量比较少，为了对其进行鉴定并得到药敏结果就要先对其进行增殖，即让其在适宜的环境下繁殖，当增殖到一定数量后进行进一步的鉴定和药敏试验。 13.为什么尿培养要进行菌落计数? 尿路感染通常是指细菌性感染，故尿液细菌数量成为其诊断的依据，而单纯根据患者的临床症状及体征难以确诊，因此尿培养对尿路感染的诊断及治疗很有意义。根据尿菌落计数的多少来区别是标本污染还是尿路感染。一般每毫升在1万个以下多为污染；10万个以上为真性细菌尿，可肯定为感染；l万～10万个为可疑，应重复培养。 14.粪便中主要致病菌包括哪些? 1）沙门菌属可导致伤寒病； 2）志贺菌属可导致痢疾病； 3）大肠杆菌O157菌可导致出血性肠炎； 4）霍乱弧菌可导致霍乱病； 5）金黄色葡萄球菌可导致化脓性肠炎； 6）变形杆菌等可导致急性肠炎； 7）白色念珠菌等可反映出抗生素使用过量，应尽快停止使用抗生素。 15.粪便的球杆菌比指什么? 球杆菌比是用于观察肠道菌群是否失调的指标，是针对长期大量应用广谱抗生素患者监测肠道菌群变化，防止二重感染的必要手段。所谓球杆菌比就是粪便中球菌与杆菌数量的比值。正常时以杆菌为主。 16.分泌物、脓液等如何留取标本? 此类标本如果直接留取会将皮肤表面的细菌一起采样，从而导致培养的结果不能准确反映出真正的致病菌。因此，在采样时应先进行局部消毒清洗，然后从深部采样，以得到真正的致病菌。采样过程可以由医护人员完成。 防患未然 1.如何根据培养结果识别标本被污染? 当看到一份阳性的细菌报告时，应将培养结果与培养的标本相结合考虑，因为特定的标本有特定的致病菌，比如痰培养的致病菌就不会是甲型链球菌和奈瑟菌，但在尿标本中培养出甲型链球菌就可能是致病菌。同时不能仅以一次的培养结果就作出判断，应多次送检。当多次培养的结果一致时，就可判定此菌是致病菌而非是污染而来。 2.化脓性感染灶培养标本的准确留取方法是什么? 化脓性病灶一般位于皮肤表面，破溃出脓，要留取细菌培养标本千万不可马虎大意，取点脓液就送检。准确的取样方法是，将脓液挤干净后在肉芽生长处取标本送培养，因为肉芽生长处营养丰富，细菌较多，容易培养出阳性结果。如果化脓性病灶尚未破溃，可以采用注射器穿刺到一定深度，估计在肉芽附近的地方抽取标本送检，培养结果会比浅处取出的标本效果好。 3.为什么要反复采血进行血培养? 血培养的标本应在病人发热初期或根据不同的发热情况在未用抗生素前采集做细菌培养。只有在高热的时候，细菌才会释放在外周血中，同时由于其含量极少，所以为了提高阳性率需连续采血进行培养。 4.如何防止尿路感染? 肾脏排泄的尿液，对膀胱和尿道起着冲洗作用，有利于细菌的排出，每天大量饮水，2～3小时排尿l次，能避免细菌在尿路的繁殖，可降低尿路感染的发病率，这是预防尿路感染最实用有效的方法。要经常注意阴部的清洁，要勤洗澡，且不要用池浴或盆浴，要勤换内裤，在新婚、月经、妊娠和产褥期，尤应注意。女婴要勤换尿布。 5.怎样防止呼吸道的细菌感染? 注意均衡饮食，进行运动，有足够休息，减轻压力和避免吸烟，以增强身体的抵抗力，同时保持良好的个人卫生习惯，保持室内空气流通。如有呼吸道感染病症，应尽早找医生诊治，愈早医治，痊愈机会愈高。 6.如何预防细菌性痢疾? 注意个人卫生，喝开水不喝生水，用消毒过的水洗瓜果蔬菜和碗筷及漱口；饭前便后要洗手，不要随地大便；吃熟食少吃凉拌菜，剩饭剩菜要加热后吃；做到生熟分开，防止苍蝇叮爬食物；得病后要及时就医治疗。 走出误区 1.痰涂片未找到结核杆菌就能排除肺结核了吗? 痰涂片未找到结核杆菌不能排除肺结核。因为结核杆菌不是随时都能随痰排出的，应采集患者在清晨漱口，深咳留取的第一口痰，并且要连续3天送检以提高检出率。 2.痰培养结果正常是没有培养出细菌吗? 痰是从呼吸道经口腔排出的，正常人的口腔中也含有大量的正常菌群，主要包括甲型链球菌和干燥奈瑟菌，这些菌对人体是不会致病的。因此，痰培养的正常结果可以包括此两种菌。 3.当痰培养没有培养出致病菌就可队断定没有细菌感染吗? 从患者的标本留取到标本的运输和接种，各个环节都会直接影响培养的结果。首先患者留取的痰标本质量，直接决定结果的准确性。当标本不合格时，即便有致病菌也可能培养不出来，从而延误诊断和治疗。留取痰液时应该是留取清晨第一口痰，留痰前用清水漱口或刷牙，有义齿者取下后漱口或刷牙，咳出深部痰，以黏性、脓性或血性为佳，白色泡沫痰一般为涎液，应弃之重新留取，痰液吐入专用无菌容器中。标本留完后，应立即送检，防止标本干涸。因此，为了提高致病菌的检出率，应适量增加送检次数。 4.尿培养阴性可队断定没有尿路感染吗? 尿培养阴性对排除尿路感染有一定价值。但是有时会出现假阴性，包括以下几种可能： 1）外阴消毒对尿培养影响很大，消毒液过多而混入尿标本，抑制了细菌生长，出现假阴性结果； 2）尿培养前曾使用抗菌药物，可出现假阴性； 3）膀胱内尿液停留时间短(不到6小时)，或饮水太多，稀释了尿中细菌，可有假阴性； 4）血源性急性肾盂肾炎、肾实质内小脓肿形成，慢性肾盂肾炎黏膜病变趋向痊愈，而肾实质病变依然存在，或尿路梗阻并存感染灶与尿路不相通，则尿中细菌往往呈阴性； 5）尿路感染的排菌可呈间歇性，如慢性肾盂肾炎没有急性症状时，尿培养可为阴性，但在其急性发作时，尿培养则常为阳性。由此可知，对尿细菌学检查结果的判断，必须结合临床表现及其他检查，有时还要反复多次进行。 5.尿培养阳性结果就是尿路感染吗? 尿培养出现假阳性有可能是尿液收集不新鲜，放置时间超过l小时，导致细菌大量繁殖，从而出现假阳性。因此应及时留取标本送检。 6.粪便中有细菌就是细菌性痢疾吗? 粪便是人体消化系统自口腔中摄入食物，经过胃、肠一系列消化吸收后，排出体外的食物残渣。它的形态、颜色、成分可直接反映出人体整个消化系统(包括胃、十二指肠、肝、胆，空肠、回肠)的功能是否健全、有无异常或局部感染病灶等。正常大便中应有大量的细菌，主要是大肠杆菌，它是肠道的主要寄生菌，同时它形成了一个正常菌群，其作用主要是： 1）维护肠道的消化吸收功能； 2）抵御外侵细菌。细菌性痢疾是由志贺菌属引起，因此，题中的说法是不正确的。 7.痢疾病人大便的细菌可以直接涂片看痢疾杆菌吗? 痢疾是由志贺菌引起的，由于粪便本身就有细菌，因此，直接涂片是无法看到志贺菌的，只有经过培养，进而才能鉴定其类别。 8.药物敏感试验表示敏感的药物杀菌效果就肯定好吗? 药物敏感试验都是将病原微生物从患者身上分离出来。然后体外培养，得到纯体后再进行鉴定和药敏试验，由于体外和体内的环境不同，有的细菌可以利用体内的一些物质生成抵抗抗生素的成分，使抗生素失效。所以会出现体外敏感，而体内耐药的情况。同时在体内用药的剂量与药敏试验的实际剂量的差异也会导致药物敏感性与临床效果出现偏差。 |
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