犬的血型与输血疗法

输血疗法是治疗疾病， 尤其是危重病例的一种重要方法。 输血疗法在人医临床上已经得 到广泛的应用，但在过去的兽医临床治疗中应用甚少，究其原因，主要是考虑动物的经济价 值和缺乏相应的血液来源。 目前随着伴侣动物的发展， 其自身的经济价值以及社会价值不断 得到提高，宠物主人在为他们的宠物治疗疾病时，已不再是仅仅考虑花费，更重要的是能否将宠物治愈。因此，输血疗法逐渐在宠物临床治疗，特别是犬病治疗中得到应用。

1. 犬的血型

通过直接或间接凝集反应以及溶血反应， 人们逐渐认识了犬的各种红细胞抗原。 到目前为止，已报道的犬血型有红细胞抗原（DEA）1.1（A1） 、红细胞抗原 1.2（A2） 、红细胞抗 原 3（B） 、红细胞抗原 4（C） 、红细胞抗原 5（D） 、红细胞抗原 6（F） 、红细胞抗原 7（Tr） 和红细胞抗原 8（He） 。最近澳大利亚又发现犬有红细胞抗原 1.3（A3）血型。红细胞抗原 1.1、红细胞抗原 1.2 和红细胞抗原7 是最强的抗原性因子[1]。犬的红细胞表面不只有一个红细胞抗原，如红细胞可以是 DEA1.1 阳性或 DEA1.1 阴性，同时 DEA1.1 阴性的红细胞也可以是 DEA1.2 阳性或 DEA1.2 阴性，这些血型表现为等显性遗传。血型为 DEA1.1、DEA1.2 和 DEA7 阳性的犬血只能给相同血型的犬输，如果血型为 DEA1.1、DEA1.2 和 DEA7 阴性的犬首次输入上述三种阳性血型中的任何一种或两种以上以后， 第二次输入同一阳性血型时肯定会发生严重的输血反应。目前未发现犬体内含有天然抗 DEA1.1 和 DEA1.2 的抗体，但犬体内确实存在抗某些血型的天然抗体。 另外， 由于地域的不同以及各品种的分布数量的差异，各地犬的不同血型所占比例也不尽相同。Pitoler Ｍe 等对美国不同品种犬调查得出 DEA1.1 占 40%，DEA1.2 占 20%，DEA3 占 5%，DEA4 占 98%，DEA5 占 20~25%，DEA6 占 98%，DEA7 占 45~50%，DEA8 占 40%。目前还未就某一品种犬的血型分布情况做出详细研究，但研究发现灵缇出现 DEA1.1 和 DEA1.2 的机率很小[2]。

2. 输血疗法的适应症

输血疗法可适用于各种原因引起的贫血； 车祸、 手术、 外伤等引发的大失血； 剧烈呕吐、 腹泻引起的血容量降低；老年性疾病；血小板和凝血因子缺乏引起的凝血不良；华法令鼠药 中毒；白细胞减少症和低蛋白血症等病症。输血可以起到迅速补充循环血量、维持一定的血压、增加血液的凝固性和血红蛋白的浓度、增加血液运输氧的能力以及刺激机体的造血机能等作用。另外对供血犬采取相应的免疫后，其血制品对犬细小病毒、犬瘟热可产生特异性的 抗病力。另外，当犬出现循环血量减少超过 30%；红细胞压积小于 20%；持续性出血；粘膜苍白；毛细血管充盈时间大于2 秒；呼吸急促和心动过速等症状则必须紧急输血。

3. 供血犬的选择

在输血时，应注意对供血犬的严格要求。供血犬的体重应大于 25 公斤；年龄在 2~8 岁 之间；临床检查正常（其中包括血常规及血液生化指标）；红细胞压积大于 40%；定期注射 疫苗；供血犬不应有红细胞抗原 1.1、红细胞抗原 1.2 或红细胞抗原 7；如果受血犬需大量输 入血小板和凝血因子，应检测供血犬的凝血时间；另外根据地域的不同，相应淘汰存在巴贝 丝虫病、利什曼原虫病、埃利希氏病、疏螺旋体病、布鲁菌病和犬恶丝虫病的供血犬。特别 应注意供血犬不可有受血经历。 采血量不应超过 20 毫升/公斤体重， 一般间隔三周采集一次。供血犬的日粮中应添加硫酸铁制剂，剂量为 10mg/kg 体重。由于灵缇血液的红细胞压积很高，静脉容易采血并且血液中很少含有 DEA1.1、DEA1.2 和 DEA7，可将灵缇作为理想的供血犬[2、5、6]。

4. 血液的采集及保存

可以从犬的颈静脉或从麻醉犬的股内动脉采集血液。 采血常用的保存液有枸橼酸磷酸葡萄糖（CPD）、枸橼酸磷酸葡萄糖腺嘌呤（CPD-A1）、酸性枸橼酸葡萄糖（ACD）和肝素[3]。CPD 能够较好保持红细胞携带氧到组织的能力，用 CPD 抗凝的血可保持 21 天。CPD-A1 则 可以维持血液中原有的 2，3—二磷酸甘油酸（2，3—DPG）和三磷酸腺苷（ATP）的浓度， CPD-A1 中的腺嘌呤可以作为红细胞合成 ATP 的底物，用 CPD-A1 可保存犬血 35 天。但最 新研究表明用 CPD-A1 保存的血 30 天后输入犬的体内后，有 27%的红细胞失活，因此建议 用 CPD-A1 保存血液最好不要超过 20 天。用肝素抗凝的血液，禁止用于患有凝血病的犬， 它可以干扰血小板的功能，其抗凝的血制品必须在 48 小时内使用，使用剂量为 625U/50ml 血液。用 ACD 保存的血液可以保存 14 天。犬的全血制品应保存在 3-6℃的条件下，温度高 于 37℃，易破坏血液的成分，低于 2℃，可形成纤维蛋白。另外应使抗凝剂和采血袋在采血 前保持在 5℃左右，以防止溶血。采血过程中必须轻轻晃动采血袋[6]。

5. 配血实验

输血前应给犬做交叉配血试验，但在紧急输血情况下，如果犬是第一次输血，可以不做配血试验。受血犬过去曾被输过不明血型的血液或需多次输血，必须做配血试验，否则，易产生输血反应。 交叉配血试验可以分为主侧配血和次侧配血两部分， 主侧配血是受血犬的血 浆或血清和供血犬的红细胞反应与否； 次侧配血是受血犬的红细胞与供血犬的血浆或血清反 应与否。由于受血犬血清中很少含有天然抗体，一般可不做次侧配血试验。任何程度的凝集反应或溶血反应都表明血型不相容[6]。

可利用盐水配血法进行检测，具体实验步骤为：

a、 分别取供血犬和受血犬的新鲜血液，用 EDTA 抗凝。

b、 用 0.9%氯化钠溶液洗三遍红细胞，分别以 1000 转/分钟离心 15 秒，去掉上清夜。

c、 将红细胞泥配成 4%红细胞盐水悬液。

d、 主侧配血：向10×75 毫米的试管加入两滴供血犬的 4%红细胞盐水悬液和两滴受血犬的血清或血浆。

e、 次侧配血：向10×75 毫米的试管加入两滴受血犬的4%红细胞盐水悬液和两滴供血犬的血清或血浆。

f、 以1000 转/分钟离心1分钟。

g、 取出观察上清液有无溶血，轻轻晃动试管，观察有无凝血[6、7]。

也可采用简易的“三滴法”配血实验，方法为取供血犬血液 1 滴、 受血犬血液 1 滴及抗凝剂 1 滴于载玻片上，混合后肉眼观察有无凝集，若无凝集，则可输血 [1] 。

6. 输血方法

静脉输血是最常用的一种方法。如果静脉输血确实有困难，也可进行腹腔输血，但腹腔输血的作用比较慢， 腹腔输血 24 小时后， 50%血细胞被吸收进入循环系统。 有腹腔输血 2~3 天后，约70%的血细胞进入循环血液。腹腔输血对慢性疾病（如慢性贫血）效果较好。幼犬静脉输血失败，可以进行骨髓内输血，用消毒后的 20 号针头或骨髓穿刺针刺入股骨或肱骨近端，输血后约 95%左右的血细胞可以被吸收进入血液循环系统。 输血前 15 分钟，可以给犬注射苯海拉明防止过敏。将血袋取出后反复颠倒数次，使沉 积的红细胞充分混匀。输血过程中发生阻塞时，须立即更换输血器具，也可在输血前向血袋 内注入 50~100 毫升生理盐水以稀释浓缩的红细胞，有利于降低血液的粘稠度。静脉输血的 剂量一般为 10~20ml/kg。如果输入 20ml/kg 的全血或 10ml/kg 浓缩的红细胞，则红细胞压积 增加 10%左右。

输血量的计算公式为：所输血量=2.2×受血犬的体重（kg）×40×（正常血 细胞比容-受血犬血细胞比容/供血犬血细胞比容）

静脉输血的速度一般应小于 10ml/kg·h， 输血最初 30 分钟一定要慢，大约 0.25ml/kg·h。输血过程中犬如果出现荨麻疹，则马上停 止输血。一般情况下血制品不用预热，但输血速度达 50ml/kg·h，则必须预热。如果要输入血小板或其它凝血因子，必须使用新鲜的血液，这是由于血小板只能存活 4-8 小时，而凝血因子Ⅷ和Ⅻ在 1-6℃条件下也只能保存 6 小时 。 输血血型发生不相容时，犬输血后 7～10 天产生抗体，此时发生凝集和溶血反应。临床上犬在输血后初期虽表现为好转，但 1～2 周后则会死亡。但犬的肾脏可以排泄大量的血红蛋白，肾脏几乎不发生任何病理变化，而人体内红细胞释放的血红蛋白可以引起肾脏病变。 由于此原因， 有时给同一条犬几次输入不相容血型也不会引起死亡。 必须注意输血的疗效是暂时的，患非再生性贫血和非溶血性贫血的犬一次性输入新鲜血液后可以维持三周左右。过量输血以及经常性输血，可以抑制自身红细胞的生成。

7. 并发症

如果供血犬和受血犬的血型相同， 一般很少发生并发症。 犬输血的并发症主要有： 发热、 过敏、溶血、循环负荷过重、低钙血症以及血凝病等。发热和过敏主要表现为高热、红斑和 瘙痒等症状，临床处理措施为减慢输血速度，给予退热剂，应用抗组织胺药物，如盐酸苯海拉明，剂量为 2mg/kg；溶血主要表现为血红蛋白血症、血红蛋白尿症、乏力、呕吐、发热、 心动过速、急性肾衰和凝血等症状，如果发生溶血反应，应立即停止输血，给予静脉输液以 及皮质类固醇和抗组织胺药物；循环负荷过重是由于输血量过大造成的，可以引起肺水肿， 应用速尿处理， 用量为 2～4mg/kg； 输入大量含枸橼酸盐抗凝剂的血液可使犬产生低钙血症， 犬临床表现为肌肉震颤、心率不齐或者呕吐。发生上述症状可以停止输血，一般可不用葡萄糖酸钙治疗； 大量输入全血或浓缩红细胞可以造成犬发生血凝病， 可用富含血小板的血浆进行治疗 。

参考文献

[1]王力光， 董君艳.新编犬病临床指南[M].长春： 吉林科学技术出版社， 2001.156-161.

[2] George Lubas. Blood transfusion in dogs and cat[DB/OL]，2000-03-21.

[3] Alice Howard，Beth Callan，Mark Sweeney，et al.Transfusion practices and costs in dogs[J].JAVMA，1992，201（11） ：1697-1701.

[4] U.Giger，C.J.Gelens，M.B.Callan，et al.An acute hemolytic transfusion reaction caused by dog erythrocyte antigen 1.1 incompatibility in a previously sensitized dog[J].JAVMA， 1995，20

（5） ：1358-1362.

[5] Task .Collect whole blood from a donor dog[DB/OL]，2000-04-02.

[6] Bartola.Fluid therapy in small animal practice[M].Philadelphia： W.B.Saunders Company， 1992.371-382