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【检测】食品微生物监测技术和实验室质量管理问答荟萃(9)

 薪满亿足 2016-07-04

    食品伙伴网食品论坛,在2009年为食品伙伴网资深网友,山东出入境检验检疫局leizhw雷质文老师开通了“食品微生物监测技术和实验室质量管理”专栏,开通至今,雷老师以自身知识和经验,为广大网友解答食品微生物相关问题,帮助很多网友解决了工作中的问题。

    感谢雷老师,今后会陆续汇总了雷老师专栏中的问题解答给大家参考,希望对大家的工作有所帮助。

leizhw(雷质文)简介:
食品伙伴网资深网友。
山东出入境检验检疫局食品农产品检测中心品质保证部部长,研究员,在食品微生物检测领域有多年工作经验,所属实验室多次迎接欧盟和美日官方检查。
国家标准 《GB/T 27405-2008 实验室质量控制规范 食品微生物检测》主要起草人,在食品微生物实验室质量控制领域有深入研究。
曾主编过多部专著,如《食品微生物实验室质量管理手册》《肉及肉制品微生物监测应用手册》等。

问题及回答
问题一

tangqiyin2007
在SN/T0176-2013蜡样芽孢杆菌检测中连续两个稀释度菌落总数在合适的范围,采用公式计算:N=连
续两个稀释度有效菌落数的平均数之和/(v*1.1*d)。请问其中1.1代表什么?是第一稀释度个数和第二稀释度平板个数*0.1之和吗?
若同一稀释度平板上只有一个平板菌落数在适宜的范围内,则计算此平板的有效菌落数,然后与其相邻稀释度的有效菌落数的平均值求和,再通过上述公式计算。请问这个时候公式中还是1.1吗?

Leizhw
1、关于1.1,为计算系数,见GB T 4789.10;
2、还是1.1;
3、第十个稀释度平板个数*0.1,不对。见SN/T 0167-2013 6.1实例!

问题二

huangji5371
GB4789.28-2013附录中,表E.2中孟加拉红培养基生长率的质控菌株为酿酒酵母ATCC9763,黑曲霉ATCC16404,考虑到我们实验室测的是霉菌,
想咨询雷老师的是:
1、真菌标准菌株(黑曲霉ATCC16404),是孢子形式的吗?
2、如果是孢子形式的,细菌的制备工作菌株悬浮液方法,适用于真菌孢子,是吗?

Leizhw
1、真菌标准菌株(黑曲霉ATCC16404),是孢子形式的吗?
----不一定,一般不是。
2、如果是孢子形式的,细菌的制备工作菌株悬浮液方法,适用于真菌孢子,是吗?
----在本实验背景下,我认为是可以的。

问题三

阿波
我们的产品标准是大肠菌群≤30MPN/100mL,如果我报告成<1cfu>

Leizhw
原则上没有办法,二者之间没有任何“代数换算”关系。
但是基于经验和风险,仅此一次可以认为所检产品在大肠菌群这个指标上是可以接收的,既没有超标。希望严格执行产品标准,下不为例吧。

问题四

yiyun121
我们实验室刚刚建立,微生物室目前分三个检测室——无菌室、霉菌室和BSL-2室,现在好几个“专家”过来都说我们的微生物实验室设置不合理,无菌室指完全没有细菌的检测室,可我们这个只是洁净等级七级的检测室所以不能叫无菌室,有的说应该叫限度检测室,有的说是洁净室,有的说干脆就叫食品检测室、微生物检测室。。。。。
各种指导我们的意见都有,麻烦雷老师帮忙解答一下到底应该叫什么?

Leizhw
1、食品农产品微生物检测,叫无菌室,没有问题的。
2、“无菌室”,约定俗成。如果质疑,我只能说该专家是“砖家”。

问题五

wnb1979
我们做实验要用到50%卵黄盐水悬液,公司不想买成品,有没有规范一点的配制标准呢?要无菌的,怎样灭菌,温度和压力有没有特殊的要求。

Leizhw
1、可BAIDU;或研读GB/T 4789.28-2003
2、重点提示:最好不要买市售鸡蛋,因为圈养鸡蛋中抗生物含量较高,对实验室结果可能影响很大,建议购买SPF鸡蛋,或没有添加抗生素饲料养殖的鸡蛋。
3、GB/T 4789.28-2003

问题六

yjiayong1988
在食品微生物检验中,做致病菌检测时的阳性对照,是指样品稀释液加入阳性菌呢还是空白稀释液加入阳性菌?

Leizhw
优先措施'样品稀释液加入阳性菌'

问题七

雨肖XY
我们实验室想做认可,关于CNAS-CL09-2014中“标准菌种必须从认可的菌种或标本收集途径获得”,“实验室必须保存有满足试验需要的标准菌种/菌株”,包括应用于培养基(试剂)验收/质量控制  然后看了4789.28-2013,后面列了各个培养基质控的菌种。
那我们是否应该根据4789的要求重新购买菌种?所有涉及到的培养基的相关菌种都应购买?都要菌种的证书?

Leizhw
CNAS-CL09-2014中“标准菌种必须从认可的菌种或标本收集途径获得”,“实验室必须保存有满足试验需要的标准菌种/菌株”,包括应用于培养基(试剂)验收/质量控制  然后看了4789.28-2013,后面列了各个培养基质控的菌种。
1、如果用实验室已有的菌种进行试验,关键生化特征完全符合,我认为没有必要根据GB 4789.28-2013的要求重新购买菌种,毕竟购买菌种的费用不菲。当然,如果实验室有条件,购买GB 4789.28-2013规定的菌株,也是值得肯定的。
2、涉及到的培养基的相关菌种不一定需要购买,其实从食品中分离出来的经过关键特征指标验证的野生菌株,更有价值,建议大家妥善保藏并合理使用从食品中分离的菌株;
3、如果能收集、索取菌种证书,不应该放弃任何机会。证书上的许多信息,对于“研究人员”来说,十分有价值!

问题八

wnb1979
我想问一下,宰杀畜禽用的水执行什么标准,也是生活饮用水标准吗?会不会比饮用水松一些,因为我们储存的自来水放置两三天菌落总数和总大肠菌群就超标了,不知能否用于宰杀禽类

Leizhw
是的,GB/T 5749 和 GB/T 5750.12
1、“会不会比饮用水松一些,因为我们储存的自来水放置两三天菌落总数和总大肠菌群就超标了,不知能否用于宰杀禽类”?
-----不会!
2、往水中加一定次氯酸钠即可。

问题九

xuefeiyuli123
雷老师再请教你一个培养基高压灭菌的问题。说明书上:平板计数培养基加热溶解121摄氏度灭菌15分钟,乳糖胆盐发酵管培养基经115摄氏度15分钟灭菌。我想问下,我把2者一同在高压锅灭菌121到126摄氏度时间20分钟,这样可以吗?或2者一同在高压锅灭菌121到126摄氏度时间15分钟可以吗?
觉得2个培养基分开灭菌觉得浪费,再一起灭菌不知怎样做才标准?

Leizhw
1、“雷老师再请教你一个培养基高压灭菌的问题。说明书上:平板计数培养基加热溶解121摄氏度灭菌15分钟,乳糖胆盐发酵管培养基经115摄氏度15分钟灭菌。我想问下,我把2者一同在高压锅灭菌121到126摄氏度时间20分钟,这样可以吗?或2者一同在高压锅灭菌121到126摄氏度时间15分钟可以吗?”
-----不可以,乳糖胆盐发酵管培养基经115摄氏度15分钟灭菌的目的是防止高温导致多糖碳化。
2、“觉得2个培养基分开灭菌觉得浪费,再一起灭菌不知怎样做才标准”?
-----没有规矩不成方圆。不可一起灭菌。

问题十

xuefeiyuli123
您好,我检验的糕点l冷加工产品,大肠菌群超标如430NPM/100g菌落总数才250。大肠菌群和菌落总数是否成正比关系?因慕斯产品是冷加工产品很容易超标,我要求所有工器具用消毒水浸泡1分钟,消毒时间达到吗?

Leizhw
1、大肠菌群超标如430NPM/100g属于间接计数/半定量测试方法结果,而菌落总数250属于直接计数结果,二者之间尚难以用“数学关系”进行比较;如要比较,大肠菌群亦需要直接计数(如GB 4789.3 和 SN);
2、消毒水浸泡所有工器具用,一般情况下,时间稍长效果越好,至少5分钟。


食品论坛小编整理,问答仅供参考。


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