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【编前语】
有人问：我买的附片做药汤怎么有时有效有时又无效果？ 生附子含有剧毒。 所以，市场上见到的附片各种品种（黑顺片、白附片、炮附子等）都是生附子的附子的炮制品。炮制附子的传统工艺，是将生附子浸泡在胆巴（盐卤）水中10几20天，然后再水洗漂洗进入切制干燥等工序环节。 但是，人们错误理解的一点是：生附子泡入胆巴水是为了去除附子的毒性。
而真实的事实是：生附子浸泡入胆巴水，是为了防止附子腐烂，因为附子成熟期正是高温高湿的夏季7-8月间，附子出土后，极容易腐烂。老百姓称其为有名的“隔夜烂”。 生附子本身含有大量的生物碱，这既包括了毒性成分，也包括了药用成分。 附子在胆巴水里浸泡，又经过退出胆巴液的漂洗浸泡，生物碱成分大量流失于水中。药性当然大打折扣 更有过度加工炮制的现象：生附子浸泡的胆巴液浓度很大，让附子吃进更大量盐卤，而且，又不合规进行漂洗。这样的附片，毒性减少了，药性流失了，又捡进来新的化学毒性成分。
看看下面专家的实验研究
（图：汉中生附子）
附子中生物碱含量与在胆巴液中浸泡时间变化规律的研究 周林1，2，李飞1* ，任玉珍2，杜杰2，陈彦琳2，梁焕2，白宗利2，张晓莉3
( 1. 北京中医药大学中药学院，北京 100102; 2. 中国药材公司中药质量控制技术
国家工程实验室，北京 100195; 3. 四川江油中坝附子科技发展有限公司，四川 江油 621700)
［ 摘要］ 目的: 采用高效液相色谱法检测在胆巴溶液中浸泡不同时间的附子中6 种生物碱的含量， 分析附子中生物碱成分随浸泡时间的变化规律。 方法: 采用 Waters sunfire C18 色谱柱( 4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ，流速 0. 8 mL·min － 1 ，柱温 30 ℃，检测波长 235 nm，流动相乙腈-四氢呋喃( 25∶ 15) 和 0. 1 mol·L － 1 醋酸铵溶液( 每 1 000 mL加冰醋酸 0. 5 mL) ， 梯度洗脱。 
（图：清洗泡胆前生附子）
结果
泥附子洗净后在胆巴溶液中浸泡，新乌头碱、次乌头碱、乌头碱和苯甲酰新乌头原碱的含量逐渐降低， 浸泡 20 d 后， 成分变化趋于平缓。浸泡 20 d 样品与生品比较，其降低率分别为 60. 39% ，73.84% ，72. 57% 和 88. 46% 。结论: 泥附子洗净后在胆巴溶液中浸泡，能达到防止腐烂的目的，浸泡20 d 以后胆附子质量稳定，时双酯型和单酯型生物碱总量均流失70% 左右，为保证临床用药的安全和有效，有必要改进泥附子产地加工方法。 附子于 6 月下旬至 8 月上旬采挖，除去母根、须根及泥沙，习称“泥附子”。因附子在夏至季节采收后极易腐烂，须进行产地加工以防止腐烂。张山雷在《本草正义》中说“此物善腐” ，《四川省彰明县概况》中记载“售腌须速， 过夜吐水， 即就腐烂”。附子产地加工的方法最早出现在宋代《本草图经》，采用酿醋腌制附子防腐; 到明末时期用盐腌制防腐，最早见于明代《景岳全书》 中“土人腌以重盐”、“腌者大咸” ; 此方法盛行于清代， 如《本草害利》、《本草从新》、《外科证治全生集》、《本经逢原》等中均有记载; 民国时期至今则演变为胆巴腌制防腐。 
（图：胆巴浸泡附子的大缸及水泥池）
现行药典制备附子饮片时均有“泥附子洗净，浸入食用胆巴的水溶液中数日” 的加工程序。有研究表明，附子在胆巴溶液中浸泡，其胆巴含量( 以氯化钙计) 随浸泡时间的变化规律符合指数函数，在 20 天后达到 25% ～ 30%，而生物碱类成分随浸泡时间的变化情况尚无文献报道。我们以《中国药典》2010 年版附子项下含量测定方法，检测置于胆巴溶液浸泡不同时间的附子样品中双酯型生物碱和单酯型生物碱类成分含量，分析生物碱在巴溶液中的变化规律， 为客观评价及改进附子产地加工方法提供科学依据。 1材料 2695- 2998 型 HPLC［(沃特世科技( 上海) 有限公司) ］，DENVEＲ 型 1 /10 万电子分析天平( 北京赛多利斯仪器系列有限公司) ， KQ- 251DA 型数控超声波清洗器( 江苏省昆山市超声仪器有限公司) 。乙腈、 四氢呋喃为色谱纯 ( Fisher 公司) ， 异丙醇、 乙酸乙酯、 冰醋酸、 醋酸铵、 三氯甲烷为分析纯( 北京化学试剂公司) 。
各对照品购于中国食品药品检定研究院， 乌头碱( 批号110720- 200410) 、 次乌头碱( 批号 110798-200404) 、 新乌头碱( 批号 110799- 200404) 、 苯甲酰次乌头原碱( 批号 111796- 200901) 、 苯甲酰乌头原碱( 批号 111794- 200901) 、 苯甲酰新乌头原碱( 批号111795- 200901) 。附子药材购于四川江油中坝附子科技发展有限公司，经中国食品药品检定研究院张继研究员鉴定为毛 茛 科 植 物乌 头 Aconitum carmichaeli Debx． 的子根。
附子在胆巴溶液中浸泡后习称“胆附子” ， 泥附子净制切片干燥后为生附片( 子) 。将江油产泥附子洗净后，置于胆巴溶液中浸泡，分别于第9，12，16，20，25，27，34，41，48，55，63，70，77，87，107 天取样， 作为在胆巴溶液中浸泡不同时间的胆附子样品备用。
2 方法与结果
2. 1 3 种双酯型生物碱和 3 种单酯型生物碱的含量测定［ 1，12- 13］
2. 1. 1对照品溶液的制备 取各对照品适量， 精密称定，用异丙醇-三氯甲烷( 1∶ 1) 溶液溶解， 配制成质量浓度分别为苯甲酰新乌头原碱0. 048 66 g·L － 1、 苯甲酰乌头原碱 0. 068 34 g·L － 1、 苯甲酰次乌头原碱0. 039 67 g·L － 1、 新乌头碱 0. 122 4 g·L － 1、 次乌头碱0. 163 2 g·L － 1、 乌头碱 0. 044 64 g·L － 1 的对照品储
备液，储存于4 ℃ 冰箱待用。
2. 1. 2 供试品溶液的制备 取附子各炮制品粉末( 过三号筛) 约 2 g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 加氨试液 3 mL，精密加入异丙醇-乙酸乙酯( 1∶ 1) 混合溶液 50 mL，称定质量，超声处理( 功率 300 W， 频率40 kHz， 水温在 25 ℃ 以下) 30 min， 放冷， 再称定质量，用异丙醇-乙酸乙酯( 1∶ 1) 混合溶液补足减失的质量，摇匀，滤过。精密量取续滤液 25 mL，40 ℃ 以下减压回收溶剂至干，残渣精密加入异丙醇-三氯甲烷( 1∶1) 混合溶液 3 mL 溶解，滤过，取续滤液，即得。
2. 2 样品含量测定 按 2010 年版《中国药典》 中附子项下的含量测定方法， 分别精密量取对照品和各供试品溶液 10 μL 注入色谱仪，测定，按外标法计算各供试品中新乌头碱、 次乌头碱、 乌头碱、 苯甲酰新乌头原碱、 苯甲酰乌头原碱、 苯甲酰次乌头原碱的含量。结果见表 1，图 1。附子不同浸泡时间样品平行取样 2 份，每份样品均平行处理 2 份供试品溶液，结果以平均值表示。最后计算各浸泡样品较未浸泡样品( 浸泡时间为 0 d) 的双酯型生物碱和单酯型生
物碱总量的降低率。A. 混合对照品; B. 浸泡不同时间样品
1. 苯甲酰新乌头原碱; 2. 苯甲酰乌头原碱; 3. 苯甲酰次乌头原碱;
4. 新乌头碱; 5. 次乌头碱; 6. 乌头碱;
图 1 胆附子 HPLC 表 1 胆巴溶液中浸泡不同时间的附子中生物碱成分的含量( n = 2) %浸泡时间/d
双酯型生物碱 单酯型生物碱
新乌头碱 次乌头碱 乌头碱 双酯型碱总量 苯甲新乌头原碱 苯甲乌头原碱 苯甲次乌头原碱 单酯型碱总量
0 0. 056 8 0. 090 6 0. 017 5 0. 165 0 0. 013 0 － － 0. 0130
9 0. 060 5 0. 059 2 0. 011 6 0. 131 3 0. 004 5 － － 0. 004 5
12 0. 052 0 0. 052 0 0. 009 8 0. 113 9 0. 003 7 － － 0. 003 7
16 0. 029 8 0. 032 0 0. 006 4 0. 068 1 0. 002 0 － － 0. 002 0
20 0. 022 5 0. 023 7 0. 004 8 0. 050 9 0. 001 5 － － 0. 001 5
25 0. 033 7 0. 030 2 0. 005 1 0. 069 0 0. 003 0 － － 0. 003 0
27 0. 028 3 0. 027 1 0. 004 3 0. 059 7 0. 003 5 － － 0. 003 5
34 0. 029 2 0. 028 9 0. 004 8 0. 062 8 0. 002 5 － － 0. 002 5
41 0. 016 4 0. 015 7 0. 003 5 0. 035 6 0. 003 0 － － 0. 003 0
48 0. 016 5 0. 014 5 0. 002 4 0. 033 4 0. 002 9 － － 0. 002 9
55 0. 020 4 0. 020 0 0. 003 1 0. 043 5 0. 003 4 － － 0. 003 4
63 0. 020 6 0. 018 9 0. 004 6 0. 044 0 0. 002 6 － － 0. 002 6
70 0. 019 3 0. 017 5 0. 003 4 0. 040 2 0. 002 9 － － 0. 002 9
77 0. 027 1 0. 027 6 0. 004 6 0. 059 2 0. 004 2 － － 0. 004 2
87 0. 027 0 0. 026 8 0. 004 4 0. 058 2 0. 004 6 － － 0. 004 6
107 0. 017 1 0. 017 8 0. 003 2 0. 038 1 0. 003 0 － － 0. 003 0
注 : “ －” 表示未检测出。 
（图：胆巴浸泡生附子）
3讨论
泥附子洗净后在胆巴液中浸泡使 3 种双酯型类生物碱和 3 种单酯型类生物碱含量均降低。附子在胆巴溶液中浸泡前20 d， 新乌头碱、次乌头碱、乌头碱的含量随时间延长逐渐下降，在20 d 时降低率分别达到 60.39% ，73. 84% ，72.57% ，20 d 后， 新乌头
碱、次乌头碱和乌头碱的含量变化不大。 生附子和胆附子中，苯甲酰次乌头原碱和苯甲酰乌头原碱含量甚微，基本检测不到，主要是以苯甲酰新乌头原碱为主。 附子在胆巴溶液中浸泡前20 d， 苯甲酰新乌头原 碱 的 含 量 逐 渐 降 低， 20 d 时 其 降 低 率 达 到88.46% 。20 d 后苯甲酰新乌头原碱含量变化趋于平缓。
泥附子洗净后在胆巴液中浸泡使双酯型生物碱总量和单酯型生物碱总量降低。浸泡9d 的样品与生附子比较，双酯型生物碱总量降低 20. 42% ， 单酯型生物碱总量降低 65. 38% ，单酯型生物碱降低率大于双酯型生物碱。其后， 两类成分的含量随浸泡时间延长逐渐降低，到 20 d 时双酯型生物碱降低率达到 69. 15% ，单酯型生物碱降低率达到88.46% 。浸泡 20 ～ 107 d 胆附子中成分变化不明显， 且单酯型生物碱降低率和双酯型生物碱降低率趋于一致，表明浸泡 20 d 后的胆附子质量基本稳定， 证明《四川省彰明县概况》［ 4］ 中记载附子 “用胆腌足二十日”的要求具有一定的科学性。
附子用胆巴溶液浸泡可以达到防腐的目的， 但造成了指标性成分的流失。据实验观察， 泥附子净制切片后制成的生附片和经过胆巴溶液浸泡 9 d 以后的样品，均能防止其在高温高湿的环境腐烂，达到防腐的目的。但泥附子洗净后在胆巴溶液中浸泡20 d 以上时，单酯型生物碱和双酯型生物碱流失约在 70% 左右。虽然双酯型生物碱含量降低使附子毒性减小，但大量的成分流失也会影响药效。证明清代《本草从新》［ 14］“土人以盐腌之， 欲减其力” 和《药笼小品》［ 14］“土人以盐腌之， 其性愈减” 的论述是有一定科学依据的。
现代科学技术条件下， 附子腐烂问题可利用先进技术或设备解决。学者［ 15-17］ 对附子采用室内自然堆放、麻袋覆盖、沙藏、冷藏等方法贮藏进行比较研究，发现低温可以明显抑制附子贮藏物质的分解，可延长贮藏期，并且以冷藏处理时，总生物碱含量下降最为缓慢。本实验中泥附子净制切片的干燥品也可以达到防止腐烂的目的， 为避免附子中生物碱因在胆巴溶液中浸泡而流失，改进加工方法，采用现代科学技术和方法解决附子易腐烂的问题具有可行性，但需对不经胆巴浸泡的生附子的炮制方法进行研究，为临床提供低毒高效的附子饮片，以保证临床用药的安全和有效。
［ 参考文献］略
（图：无胆浸泡的加工附子）
（图：无胆浸泡并科学加工的无毒附片）
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