很多时候我们需要对某DNA片段进行PCR扩增进行下一步测序,但经常会发现有些引物不理想,可能是位于序列重复区,可能是有引物二聚体,可能是有很多非特异的扩增产物,在这里游侠向大家推荐一个网站。 http://www./order/genome-database/searchResults,选择primer design。 有三种方式: 第一种是直接输入目标信息,可以是基因名称,SNP编号或DNA序列 第二种是直接输入基因组位点(hg38),如果你的突变位点是hg19,可以通过liftOver进行转换http://genome./cgi-bin/hgLiftOver, 第三种是直接上传vcf或bed文件。 我们直接输入rs671,结果如下 是的,可以直接订购哦,只要88元人民币,真是良心价!事先声明游侠没有收广告费,为了测试一下真实实力,我们输入了脊肌萎缩症SMN1基因上那个独特的c.C840T突变,果然没有让我失望,它没有设计出来,不过游侠认为这对于一般的验证是足够了,性价比不错。 感谢良培基因的谭灏文博士提供上述网站。 关注公众号,查看更多技巧! |
|