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顺铂是临床上广泛应用的化疗药物，单用或者联合其他药物可用于多种肿瘤的治疗。大量研究表明，联合化疗，特别是传统化疗药联合中药，对增加抗癌疗效和减轻单药不良反应具有很大应用价值。姜黄挥发油（TVO）为姜科姜黄属植物姜黄的主要提取物，具有抗炎、抗菌、祛痰、止咳、平喘等作用。TVO能有效抑制人皮肤鳞状细胞癌（简称鳞癌）A431细胞增殖，并诱导其凋亡。昝雪娟等将TVO与顺铂联合作用于体外培养的人皮肤鳞癌A431细胞，探讨其相互作用及抑癌机制。 姜黄挥发油联合顺铂对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖和凋亡的影响及机制 昝雪娟 荣冬芸 潘军玲 吕琳娜 肖露 曹煜 作者单位：贵州医科大学（昝雪娟、荣冬芸、潘军玲、吕琳娜、肖露）；贵州医科大学附属医院皮肤性病科（曹煜） DOI：10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2018.04.011 《中华皮肤科杂志》，2018，51（4）：294-298 【关键词】 肿瘤，鳞状细胞； 细胞系，肿瘤； 姜黄△； 顺铂； 药物疗法，联合； 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶； P糖蛋白； A431细胞 取对数生长期A431细胞，用5、10、20、40、80 mg/L TVO处理，对照组用含有1％二甲基亚砜（DMSO）的DMEM高糖培养基处理，24 h后，CCK8法检测细胞增殖情况。另取部分A431细胞，分为4组，分别用含1％ DMSO的DMEM高糖培养基（对照组）、40 mg/L TVO（TVO组）、10 mg/L顺铂（顺铂组）、40 mg/L TVO和10 mg/L顺铂（TVO + 顺铂组）处理24 h后，利用CCK8法检测细胞增殖活性；倒置显微镜观察细胞形态变化；吖啶橙（AO）/溴化乙锭（EB）双染色荧光显微镜观察细胞凋亡情况；比色法检测Caspase-3、Caspase-9酶活性；Western印迹检测Caspase-3、P糖蛋白表达。 图1 荧光显微镜下观察各组A431细胞凋亡（× 200） 1A：对照组细胞核较大，核膜完整； 1B：姜黄挥发油组可见少量细胞核染色质着黄色或橙黄色的早期凋亡细胞； 1C：顺铂组可见大量黄色荧光和橘红色荧光； 1D：姜黄挥发油 + 顺铂组细胞密度下降，可见橘红色坏死细胞及碎片 5、10、20、40、80 mg/L TVO作用A431细胞24 h，对细胞增殖抑制率分别是（12.83 ± 6.4）%、（16.27 ± 11.4）%、（21.61 ± 9.1）%、（33.11 ± 2.0）%和（46.00 ± 3.3）%，与对照组（4.03 ± 1.4）%比较差异均有统计学意义（P < 0.05）；24="" h时抑制50%细胞增殖的tvo浓度为（61.66="" ±="" 1.03）="" mg/l；tvo组、顺铂组及tvo="" +="">P <>P < 0.05）。tvo组、顺铂组细胞均不同程度变圆并出现凋亡，tvo="" +="" 顺铂组细胞明显减少，出现大量细胞碎片。tvo组、顺铂组及tvo="" +="" 顺铂组细胞caspase-3酶活性分别是1.117="" ±="" 0.095、1.381="" ±="" 0.089、1.520="" ±="" 0.115，caspase-9酶活性分别是1.259="" ±="" 0.059、1.829="" ±="" 0.171、2.760="" ±="" 0.297，caspase-3蛋白表达量分别是1.156="" ±="" 0.006、1.296="" ±="" 0.021、1.482="" ±="" 0.016，p糖蛋白表达量分别是1.311="" ±="" 0.011、1.169="" ±="" 0.012、0.528="" ±="" 0.014，其中tvo="" +="">P <> 姜黄挥发油与顺铂联用可协同抑制人皮肤鳞癌A431细胞增殖并诱导其凋亡，其机制可能与活化Caspase系统并降低P糖蛋白表达相关。 |
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