|
白癜风是以Th1型细胞为主介导的疾病，趋化因子受体3及其配体CXCL9和CXCL10被认为是在白癜风等自身免疫和炎症过程中促进T细胞迁移最相关的趋化因子轴之一。CXCL9、CXCL10等在白癜风发生发展中起关键作用。血清CXCL10可能是监测疾病活动和指导进展期白癜风治疗的新型生物标志物。他克莫司是一种免疫调节剂，临床上已证明其治疗白癜风有效。Tu等研究表明，他克莫司对HaCaT细胞IFN-γ相关细胞因子产生影响。本研究采用实时荧光定量PCR及Western印迹法检测他克莫司对IFN-γ刺激HaCaT细胞分泌CXCL9、CXCL10及相关信号途径关键蛋白的影响，为他克莫司治疗白癜风作用机制的研究提供依据，亦可有助于探讨其他器官特异性自身免疫疾病的发病机制。 他克莫司对γ干扰素刺激HaCaT细胞分泌趋化因子CXCL9和CXCL10的影响及机制研究 杨赛琳 许文 林福全 周妙妮 许爱娥 作者单位：浙江中医药大学附属杭州第三医院皮肤科 DOI：10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2018.05.013 《中华皮肤科杂志》，2018，51（5）：375-378 【关键词】 白癜风； 干扰素γ； 趋化因子CXCL9； 趋化因子CXCL10； Janus激酶类； STAT1转录因子； HaCaT细胞； 他克莫司 1、10、20、40、60、80、100、120 mg/L他克莫司预处理HaCaT细胞4 h后，噻唑蓝法（MTT）检测细胞增殖。HaCaT细胞分为空白对照组，IFN-γ组（500 U/ml），他克莫司组（20 mg/L）及他克莫司+ IFN-γ组。他克莫司预处理HaCaT细胞4 h， IFN-γ刺激细胞12 h或48 h，实时荧光定量PCR检测细胞CXCL9、CXCL10 mRNA表达。Western印迹法检测细胞CXCL9、CXCL10、p-JAK1、p-STAT1蛋白表达。ELISA法检测细胞培养上清液CXCL9、CXCL10蛋白含量。 20 mg/L他克莫司对HaCaT细胞CXCL9、CXCL10、p⁃JAK1、p⁃STAT1蛋白表达的影响 1：空白对照组； 2：500 U/ml γ干扰素组； 3：他克莫司组； 4：他克莫司 + γ干扰素组 结果显示，他克莫司对HaCaT细胞增殖无影响的最大浓度为20 mg/L。20 μg/ml他克莫司能抑制HaCaT细胞中IFN-γ诱导的CXCL9、CXCL10 mRNA与蛋白的表达，能抑制HaCaT细胞培养上清液中CXCL9、CXCL10蛋白表达，抑制HaCaT细胞中JAK1及STAT1的磷酸化。该研究为进一步阐明他克莫司治疗白癜风的作用机制及对他克莫司的临床合理应用提供了一定实验依据。 |
|
|
