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高灵敏特异性CTC检测方法,你还不知道?

 paul2020 2018-07-10

癌症与CTC


从强生的CellSearch开始,上皮细胞标志物EpCAM被广泛用于检测CTC,但是随着人们对肿瘤转移机制理解的深入,上皮间质转换(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)成为一个不能被忽略的环节。肿瘤细胞进入血管的过程中可能会发生EMT,导致上皮标志物表达水平下降,同时间质标志物表达上升。这就限制了基于EpCAM标志物检测CTC的敏感性。


So ?

此次小编要分享的研究中,结合了阴性富集(negative enrichment,NE)、免疫荧光(immunofluorescence,im)CD45染色以及荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH),用于CTC的富集鉴定和计数。

 

NE技术用于CTC的富集。该研究中采用食管癌细胞系Eca-109对NE技术进行了验证,结果显示平均回收率高于80%

回收率棒棒哒


imFISH技术用于检测染色体倍体情况。染色体多倍体在人类肿瘤中普遍存在,与多个肿瘤重要特征相关,是肿瘤发生的重要驱动。该研究在肺癌、胃癌、乳腺癌和食管癌的细胞系中对该方法进行了验证,结果显示4种肿瘤细胞系中多倍体细胞的比率>96%,说明利用染色体多倍体这一标志检测CTC是科学可行的。

多倍体比例很高哟


综上所述,NE-imFISH平台对于CTC的富集和鉴定是十分有效的


Then ?

随后,又采用临床样本对该方法进行了验证。肺癌患者的CTC数目显著高于健康人群和肺部良性疾病患者(P<>


根据尤登指数计算,当cut-off=2时,该方法可用于区分癌症和良性人群(包括健康人和良性疾病患者)。此时,肺癌、胃癌、乳腺癌和食管癌患者中CTC的检出率分别为71.33%、86.21%、76.77%和78.35%。此外,CTC在上述4种癌症中的I期检出率分别为64.15%、83.33%、78.95%和68.18%,这说明采用该方法进行CTC检测有助于癌症的早期诊断,并辅助指导患者治疗。


这项研究表明,利用NE-imFISH平台可以在不同癌种中检测CTC,并具有较高的敏感性和特异性,对于提高临床上对癌症患者的管理水平具有重要意义。


参考文献:Li, Yang, et al. 'Improvement of sensitive and specific detection of circulating tumor cells using negative enrichment and immunostaining-FISH.' Clinica Chimica Acta (2018).

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