临床上常使用APTT作为LA筛查试验,由于不同商品试剂盒中磷脂的种类和含量不同,导致LA检测的敏感性存在明显差异。实验证实,使用磷脂含量较多的检测试剂可以消除LA对APTT检测结果的影响。
临床上更多使用的是稀释蝰蛇毒时间试验(dilute Russellviper venom test,dRVVT),其原理是在待测血浆中加入激活剂蝰蛇毒和钙离子,蝰蛇毒可直接活化凝血因子X,使血液凝固若待测血浆中存在LA,则凝固时间延长。该试验是证明LA存在的特异且简便的检测手段,在对有血栓形成倾向患者的回顾性和前瞻性研究中显示:相比APTT结果异常,dRVVT异常的患者具有更高的血栓发生风险。
为防止引入更多筛查试验导致LA的假阳性率增加,国际血栓与止血学会(ISTH)将LAC的筛查试验限定为dRVVT和APTT( 低磷脂浓度)。美国临床和实验室标准协会(CLSI)指南中推荐dRVVT和APTT作为LA的一线筛查试验,但不排斥使用其他检测方法。dRVVT因其对2-GP 依赖的LA的高敏感性以及与血栓发生的密切相关性,成为LA首选筛查试验,而操作简便成本低廉的APTT检测,则成为临床上与dRVVT组合的常规测试方式。
确认试验
确认试验的基本原理是通过增加磷脂浓度以抵消LA的抗凝作用。当待测血浆中存在LA时,在增加磷脂浓度后血浆凝固时间缩短; 相反,若存在其他凝血因子抑制物,则凝固时间不会被纠正。筛查试验异常时,需要进行确认试验。
复合试验
复合试验是指对每个患者同时进行筛查试验(低浓度磷脂试剂) 和确认试验(高浓度磷脂试剂) ,然后计算凝血时间纠正百分比。凝血时间纠正百分比=(筛查试验比值-确认试验比值) /筛查试验比值×100%,或者标准化LA比值=筛查试验比值/确认试验比值的比值。
复合试验的优势在于检测低浓度的LA,此时患者凝血时间延长可能不明显,但通过筛查试验和确认试验的比值差异却可反映出LA的存在。