一种治疗慢性和难治性原发性血小板减少性紫癜的药物的制作方法

专利名称：一种治疗慢性和难治性原发性血小板减少性紫癜的药物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗慢性和难治性原发性血小板减少性紫癜的药物，尤其是以中草药为原料制成的纯中药药物。
背景技术：
原发性血小板减少性紫癜(ITP)是临床上常见的出血性疾病，该病主要特征为血小板减少，出血时间延长，皮肤和粘膜瘀点或瘀斑、血肿，严重者可有胃肠道和泌尿道出血等症状。根据病情可分为急性型和慢性型。急性原发性血小板减少性紫癜可能与病毒感染有关，常发生于感染后2～21天，以儿童多见，起病急骤，有严重血小板减少及出血症状，约半数急性ITP患者6周内血小板恢复正常，80％～90％半年内治愈，少数病例呈现反复发作，10％转为慢性型，约有1％患者因颅内出血而死亡。慢性原发性血小板减少性紫癜(CITP)为成人的一种原发疾病，多见于年轻女性，一般很少自行缓解，病程较长，可达1年至数年，甚至数十年。发作与缓解交替，有时呈急性发作，其死亡率约为3.9％～4.4％，颅内出血仍为主要致死原因。对肾上腺糖皮质激素等药物治疗无效及脾切除无效的CITP又称为难治性ITP，患者死亡率高达16.6％。
目前，国内外对慢性和难治性原发性血小板减少性紫癜的治疗方法有化学药物治疗、中医中药辨证治疗和脾切除治疗。这些治疗遇到了以下棘手问题1.化学药物治疗以肾上腺糖皮质激素等免疫抑制剂为主要治疗手段，近年来，采用大剂量静脉滴注免疫球蛋白、输血小板、他莫昔芬及各种新型免疫抑制剂如环磷酰胺、环孢霉素A、长春新碱、长春地辛等已开始应用于临床，但这些化学药物的应用均未使慢性和难治性ITP的治疗发生根本性改观，且价格昂贵，毒副作用较大，病人有的难以接受。①肾上腺糖皮质激素是治疗本病的首选药物，对急性ITP也有一定的疗效，近期有效率达70％～90％，完全缓解率为29.5％，但停药后易复发。长期应用不良反应较多，如柯兴面容、血压升高、水钠潴留、胃酸过多、骨质疏松、低血钾、高血糖、激素性精神病以及肾上腺皮质萎缩等。②静脉注射免疫球蛋白(IVIg)综合一些学者临床报道结果，稳定缓解率仅为5％～10％，而且有10％～20％的患者可出现耐药性。不良反应有头痛、不适及静脉炎等。③干扰素(INF)国外先后有学者观察到INF治疗难治性ITP部分有效，但个别报道有引起严重上消化道出血及颅内出血现象。④环孢霉素A(cyclosporin A，CyA)为强效免疫抑制剂，90年代以来国外开始尝试用CyA治疗慢性和难治性ITP。1996年Emilia等观察了8例难治性自身免疫性疾病的患者长期应用CyA的疗效，随访13～62个月，其中3例患者完全缓解，2例患者部分缓解。不良反应主要有上腹饱胀、食欲减退、肝肾功能受损、多毛症及继发性肿瘤。⑤达那唑(Danazol)有效率约25.5％～61.9％，停药后易复发。主要不良反应有出血性膀胱炎、骨髓抑制、脱发、肝功能受损等。⑥环磷酰胺缓解率23.6％～45％。不良反应包括骨髓抑制、脱发、出血性膀胱炎、肝功能受损、不孕、继发性肿瘤及急性白血病。⑦硫唑嘌呤缓解率仅为12.0％，不良反应有骨髓抑制、厌食、恶心、呕吐、继发性肿瘤如淋巴瘤。⑧长春新碱(VCR)用量每周1～2mg，疗程3～6周，静脉缓慢滴注，可使约半数ITP患者血小板迅速、暂时改善，完全缓解率仅为5％～10％，不良反应包括严重的低血压和发热，还有神经炎、粒细胞缺乏、白细胞减少、肝炎、脱发、便秘等。若药液漏出血管，可引起局部组织坏死。
此外，长春地辛、抗淋巴细胞球蛋白、左旋咪唑、胎肌液、他莫昔芬等药物也可治疗慢性和难治性ITP，但均未取得一致性疗效，并且也存在着一定的不良反应。
2.脾切除对病人创伤较大，缓解率仅为50％～80％，一年后复发率26.87％，复发后再缓解率约为58％。
3.中医中药辨证治疗辨证施治是中医治疗疾病的特色，体现了中医治疗因人而异的灵活原则。临床一般将慢性和难治性ITP分为血热妄行、阴虚火旺、气不摄血、瘀血阻络四型。尹艳以紫茜合剂为基础方加减，共治疗慢性和难治性ITP82例，总有效率78％，血小板计数在治疗前后有显著性差异；张赓莉将本病分为阴虚火旺和阴阳两虚型，阴虚火旺型以滋阴凉血方治疗，阴阳两虚型以温阳补肾方治疗，共治疗ITP34例，其中阴虚火旺型15例，有效10例，阴阳两虚型19例，有效16例，总有效率83.3％；曹学军将慢性和难治性ITP分为阴明实热、血热妄行，肾阴不足、阴虚火旺，劳伤心脾、脾不统血，肝郁气滞四型，阴明实热、血热妄行型用化斑汤、犀角地黄汤、玉女煎治疗，肾阴不足、阴虚火旺型用二至丸合知柏地黄汤加减治疗，脾气不足、气不摄血型用人参归脾汤加减治疗，肝郁气滞、气滞血瘀型用血府逐瘀汤加三七粉治疗，共治疗慢性和难治性ITP69例，总有效率81％。

发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种具有一致性疗效，无明显毒副作用，价格低廉，停药后无反跳现象发生的，用于治疗慢性及难治性ITP的纯中药药物。
本发明解决方案是通过长期的临床观察和深入的分析研究，依据中医理论和现代中药药理研究的成果，分析中西医治疗慢性和难治性ITP的经验和不足，从解决慢性和难治性ITP患者的病因入手，应用补气、补血、补肾、滋阴、安神、凉血、止血等药物，组成了纯中药制成的药物。
本发明是这样实现的，一种治疗慢性和难治性原发性血小板减少性紫癜的药物，它是由下述重量配比的原料制成的药剂当归12～22重量份枸杞子 12～20重量份地榆12～20重量份远志12～16重量份柏子仁 12～16重量份玉竹12～18重量份沙参12～18重量份阿胶12～16重量份。
将上述各组分制成合剂的生产方法是将上述原料先用水清洗一遍，再用水浸泡1小时后，煎煮0.5～1小时，将所得药液倒出，再在原料中加水，煎煮0.5～1小时，倒出药液，再加水煎煮，共煎煮三遍，将煎煮三遍所得的药液合并、过滤，将每100g重量的原料所得的煎煮液，浓缩为190～210ml，制成本发明之药物的合剂。
本发明的药物临床使用结果表明，有下述优点1.本发明选用天然中药材，不加入任何添加剂，利用各药的综合作用，对免疫双向调节，对人体无毒无害。
2.本发明药物口服无异味，服用方便。
3.初次就诊者单独应用本药物即可。就诊时已应用其他药物者，应用本药物时，可根据病情、用药时间及原用药物种类，立即停药或逐渐停用原用药物。
4.本发明的药物疗效好，有效率达100％，且无停药反跳现象。
5.本发明的药物费用低廉，疗程短，治愈和恢复血小板计数＞100×109/L所需天数为6～34天，平均21天。
具体实施例方式
下面进一步说明本发明。
为表明本发明药物对慢性和难治性ITP的治疗效果，探讨其治疗机制，我们以本发明之药物制成的合剂(以下简称本发明之合剂)为例，从基础药理和临床应用两方面进行了研究。
一、基础药理研究结果显示(一)胃肠道给药对小鼠外周血小板计数(BPC)的影响结果证明，本发明之合剂大、小剂量组、强的松组均能明显提升小鼠的外周BPC，与生理盐水组比较差别有非常显著性意义(**P＜0.01)；大、小剂量本发明之合剂组与强的松比较，差别无显著性(#P＞0.05)。大、小剂量本发明之合剂组相比较，差别无显著性意义(·P＞0.05)。
表1 本发明之合剂对小鼠外周血小板计数的影响药物剂量 动物数 BPC(×109/L) 血小板增加组别(/kg) (只)X±S (％)生理盐水 20ml 10 679.9±84.9 -强的松50mg 10 1024.2±114.1** 58％小剂量本发明之合剂25g 10 1135.2±133.0**# 67％大剂量本发明之合剂50g 10 1148.3±110.5**#· 68.9％注t检验，**P＜0.01，#P＞0.05，·P＞0.05(二)胃肠道给药对家兔血小板计数(BPC)的影响结果显示，本发明之合剂能提升正常家兔外周血小板计数，与对照组相比，差别有非常显著性意义(P＜0.01)。
表2 本发明之合剂对家兔血小板计数的影响药物剂量动物数 BPC(×109/L)血小板增加组别(/kg) (只) X±S(％)生理盐水 8ml 6226.5±35.17 -本发明之合剂 10g 6344.5±39.10**52％注t检验，**P＜0.01
(三)本发明之合剂对60Co照射所致血小板减少症的动物模型的作用由表3可见，本发明之合剂组与60Co照射+生理盐水组比较，差别有非常显著性意义(##P＜0.01)，与生理盐水组比较，差别无显著性(·P＞0.05)；而60Co照射+生理盐水组与生理盐水组比较，差别有非常显著性意义(**P＜0.01)。实验结果说明，60Co照射所致血小板减少症的动物模型是成功的，本发明之合剂对60Co照射所致血小板减少症的病理模型有良好的保护作用。
表3 本发明之合剂对60Co照射所致小鼠血小板减少的影响药物剂量 动物数 BPC(×109/L)血小板增加组别(kg) (只) X±S(％)生理盐水20ml 10 766.9±109.3 -60Co+生理盐水 20ml 10 509.7±70.20**-33.5％60Co+本发明之合剂 25g10 805.9±115.7##·5.1％注t检验，本发明之合剂组与生理盐水组比较，·P＞0.05，与60Co照射+生理盐水组比较，##P＜0.01；生理盐水组与60Co+生理盐水组比较，**P＜0.01(四)胃肠道给药对小鼠凝血时间(CT)的影响本发明之合剂与止血敏组相比较，差别无显著性(·P＞0.05)，与生理盐水对照组比较，差别有非常显著性意义(**P＜0.01)；止血敏组与生理盐水组相比较，差别有非常显著性(##P＜0.01)。
表4 本发明之合剂对小鼠凝血时间的影响药物剂量 动物数 凝血时间(S) 缩短凝血时间组别(/kg) (只) X±S(％)生理盐水 20ml 10 132±18 -止血敏 0.5mg 10 52±12## 60.6％本发明之合剂 25g10 48±17·**63.6％注本发明之合剂组与生理盐水组比较，**P＜0.01，与止血敏组比较，·P＞0.05；止血敏组与生理盐水组比较，##P＜0.01
(五)胃肠道给药对小鼠出血时间(BT)的影响本发明之合剂与安络血组比较，差别无显著性(·P＞0.05)，与生理盐水对照组比较，差别有非常显著性(**P＜0.01)安络血组与生理盐水组比较，差别有非常显著性(##P＜0.01)。
表5 本发明之合剂对小鼠出血时间的影响药物剂量动物数 凝血时间(S) 缩短凝血时间组别(/kg) (只) X±S(％)生理盐水 20ml10 483±68 -安络血 15mg10 201±41## 58.2％本发明之合剂 25g 10 192±57·** 60.2％注本发明之合剂组与生理盐水组比较，**P＜0.01；与安络血组比较，·P＞0.05；安络血组与生理盐水组比较，##P＜0.01(六)本发明之合剂对家兔骨髓巨核细胞分化的影响本发明之合剂组骨髓产板型巨核细胞与巨核细胞总数百分比，显著高于对照组，差别有显著性意义(*P＜0.05)，说明本发明之合剂具有促进巨核细胞分化成熟的作用。
表6 本发明之合剂对家兔骨髓巨核细胞的影响药物剂量 动物数产板型巨核占巨核细胞组别(/kg) (只) 总数百分比(X±S)生理盐水8ml 6 22.5％±1.98％本发明之合剂10g 6 33.5％±2.95％*注t检验，*P＜0.05(七)骨髓细胞增殖反应由表7可见，本发明之合剂可促进骨髓细胞增殖反应，与生理盐水对照组相比，差别有显著性意义(*P＜0.05)。
表7 本发明之合剂对骨髓细胞增殖的影响药物剂量动物数 骨髓细胞增殖(OD)组别(/kg) (只) (X±S)生理盐水 20ml10 0.464±0.0544本发明之合剂 25g 10 0.574±0.0545*注t检验，*P＜0.05
(八)淋巴细胞转化功能试验由表8可见，本发明之合剂可使PHA活化的淋巴细胞转化率提高，与生理盐水对照组相比，差别有非常显著性意义(***P＜0.001)，说明本发明之合剂可显著增强细胞免疫功能。
表8 本发明之合剂对淋巴细胞转化率的影响药物剂量动物数 淋巴细胞转化百分率组别(/kg) (只)(X±S)生理盐水 20ml10 34.2％±2.76％本发明之合剂 25g 10 62.2％±3.98％***注t检验，***P＜0.001(九)淋巴细胞增殖反应由表9可见，本发明之合剂可增强正常小鼠的脾淋巴细胞增殖反应，使ConA激发的T淋巴细胞增殖反应明显，与生理盐水对照组相比，差别有非常显著性意义(**P＜0.01)，说明本发明之合剂能显著增强细胞免疫功能。
表9 本发明之合剂对脾淋巴细胞增殖的影响组别 药物剂量 动物数脾淋巴细胞增殖(OD)(/kg) (只) (X±S)生理盐水 20ml 100.56±0.0533本发明之合剂 25g100.718±0.0912**注t检验，**P＜0.01(十)腹腔巨噬细胞吞噬功能检测由表10可见，本发明之合剂可提高腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率，与生理盐水对照组相比，差别有非常显著性意义(**P＜0.01)，说明其能显著提高小鼠非特异性免疫功能。
表10 本发明之合剂对腹腔巨噬细胞吞噬率的影响药物剂量 动物数 吞噬率(％)组别(/kg) (只)(X±S)生理盐水 20ml 10 27.9±6.40本发明之合剂 25g 10 39.1±3.80**注t检验，**P＜0.01
(十一)定量溶血分光光度测定法(QHS)结果显示，本发明之合剂组抗体生成减少，与生理盐水对照组相比，差别有显著性意义(*P＜0.05)，提示本发明之合剂对体液免疫具有抑制作用。
表11 本发明之合剂对抗体形成的影响组别 药物剂量动物数 半数溶血值(HC50)(/kg) (只) (X±S)生理盐水 20ml10 272.4±25.3本发明之合剂 25g 10 201.6±20.9*注t检验，*P＜0.05通过以上实验，可得出以下结论1.本发明之合剂可促进小鼠骨髓细胞增殖，促进家兔骨髓巨核细胞的分化与成熟，提升外周血小板计数；并对60Co照射所致血小板减少症动物模型有良好的保护作用。
2.本发明之合剂可缩短正常小鼠出、凝血时间。
3.本发明之合剂可增强小鼠的非特异性免疫和细胞免疫功能，抑制体液免疫功能，具有免疫调理作用(双向调节作用)。
4.本发明之合剂对治疗慢性和难治性ITP的可能作用机制是①通过刺激骨髓，促进造血干细胞的分化发育；促进骨髓产板型巨核细胞的分化与成熟，使血小板生成增加。②通过抑制抗血小板抗体的产生，减少血小板破坏，提升外周血小板计数。③免疫调理作用本发明之合剂可通过提高细胞免疫功能，抑制体液免疫功能，纠正慢性和难治性ITP患者的免疫调节紊乱状态。
二、临床观察资料1.1病例选择门诊和住院病例，所选病例均符合《血液病诊断及疗效标准》中的慢性和难治性ITP诊断标准，即1.广泛出血累及皮肤、粘膜及内脏。2.多次实验室检查血小板计数减少。3.脾脏不增大或仅轻度增大。4.骨髓检查巨核细胞数增多或正常，有成熟障碍。5.以下五项中应具有其中一项(1)泼尼松治疗有效；(2)脾切除治疗有效；(3)PAIg增高；(4)PAC3增高；(5)血小板寿命测定缩短；6.排除继发性血小板减少症。共有102例，其中男性43例，女性59例，年龄11～57岁，病程5个月～6年，均采用肾上腺糖皮质激素、免疫球蛋白、输血小板、大剂量维生素C等药物治疗无效，其中有22例不适合或病人不同意做脾切除，3例脾切除后无效，换用该合剂治疗。
1.2用药方法每次服用本发明之合剂150ml，一日3次，连服10天为一疗程，小儿酌减。用药期间缓慢停用强的松等药物，有的根据病情即可停用任何药物。
1.3观测指标治疗前后检验血液中血小板数量及病人的皮肤紫癜消退情况、粘膜出血如牙龈渗血等状况、食欲及精神状态等。
2.1疗效判断标准根据《血液病诊断及疗效标准》分为显效血小板恢复正常，无出血现象，持续3个月以上。维持2年以上无复发者为基本治愈。
良效血小板升至50×109/L或较原水平上升30×109/L以上，无或基本无出血症状，持续2个月以上。
进步血小板有所上升，出血症状改善，持续2周以上。
无效血小板计数及出血症状无改善或恶化。
2.2总疗效102例病人，基本治愈30例，显效48例，良效24例，总有效率100％。
2.3出血症状完全消失天数基本治愈最长者26天，平均18天；显效和良效最长者34天，最短者16天，平均27.5天。
2.4治愈和恢复血小板计数＞100×109/L所需时间为6～34天，平均21天2.5基本治疗后血小板计数基本治愈与显效病例为(126.5±11.3)×109/L，平均上升78.9×109/L。
实施例按下述配比称取原料当归 18g枸杞子 18g地榆 12g远志 12g柏子仁 12g玉竹 16g沙参 16g阿胶12g将上述原料先用水清洗一遍，再用水浸泡1小时后，煎煮0.5～1小时，将所得药液倒出，再在原料中加水，煎煮0.5～1小时，倒出药液，再加水煎煮，共煎煮三遍，将煎煮三遍所得的药液合并、过滤，将煎煮液浓缩为230ml，制成本发明之药物的合剂。
慢性和难治性ITP，由于病程较长，均已经历长期的大剂量肾上腺糖皮质激素等免疫抑制剂及其他药物的治疗，有的甚至实施了脾切除手术，病人均表现出中医所说的“虚证”，主要表现为心悸、气短、乏力、精神萎靡、情绪低落、睡眠不佳、食欲不振等，因此，我们选用了沙参、玉竹、阿胶、枸杞子、当归为主，予以滋阴、补气、补血、补肾，以消除病人气短、乏力等虚证症状；辅以远志、柏子仁养血安神，消除病人紧张、失眠等症状；配以地榆等止血、凉血，消除病人的出血、紫癜等病症，因而呈现出理想的治疗效果。
现代单味中药研究已证实，处方中的当归能显著增强腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬功能，提高网状内皮系统对染料的廓清速度，对皮质激素所致的免疫抑制作用具有拮抗作用，说明其可促进非特异性免疫功能；有资料报道，当归可促进体液免疫功能，也有资料报道其是抑制体液免疫功能；能明显促进ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞的DNA和蛋白质的合成，且对淋巴细胞有较强的活化作用，说明其可提高机体细胞免疫功能；对正常或辐射损伤的小鼠多能造血干细胞(CFU-S)均有促进增殖作用，可显著促进骨髓和脾细胞造血功能的恢复。处方中的枸杞子能明显增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能，增强网状内皮系统对印度墨汁的吞噬能力，增强非特异性免疫功能；对TD抗原的免疫应答和IgG、IgE抗体的免疫应答有明显的增强作用，并可增加免疫抑制动物的TH细胞数目，提高TH/TS比值，增强体液免疫和细胞免疫功能有报道，枸杞子冻干粉悬液能拮抗环磷酰胺抑制骨髓造血功能的作用，大鼠试验发现枸杞多糖在增强脾细胞增殖的同时，脾脏去甲肾上腺素明显下降，下丘脑去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺的含量亦下降，血浆皮质酮水平降低，由此认为，枸杞子增强免疫功能的作用部分是通过调节下丘脑、免疫器官的交感神经及经肾上腺皮质功能的相互协调而实现的；此外，枸杞子尚有促性腺功能作用，对阳虚患者恢复正常生理调节功能有益。处方中的沙参对于SRBC免疫小鼠脾脏溶血空斑形成细胞数有显著抑制作用，于致敏前注射能显著抑制SRBC所致小鼠血清凝集素抗体的生成；对PHA、ConA刺激下的正常人外周血淋巴细胞转化也呈抑制作用，说明其对特异性体液免疫及细胞免疫均有明显的抑制作用，因滋阴力强，常作为养阴药用于阴虚证和自身免疫性疾病的治疗。处方中的阿胶可使血红蛋白、红细胞、白细胞、血小板均明显增加，该作用可能与所含胶原蛋白、糖胺多糖对造血干细胞及造血系统的组织分化的促进作用有密切关系；可提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数，对自然杀伤细胞具有促进作用，促进健康人淋巴细胞转化，提高机体的免疫功能；还能明显提高60CO照射小鼠存活率，有良好的抗辐射作用。这些现代研究的结果恰恰与本发明药物的组方依据相吻合。
权利要求
1.一种治疗慢性和难治性原发性血小板减少性紫癜的药物，其特征在于，它是由下述重量配比的原料制成的药剂当归 12～22重量份枸杞子12～20重量份地榆 12～20重量份远志 12～16重量份柏子仁12～16重量份玉竹 12～18重量份沙参 12～18重量份阿胶 12～16重量份。
2.如权利要求1所述的一种治疗慢性和难治性原发性血小板减少性紫癜的药物，其特征在于，其中各原料的重量配比为当归 18重量份枸杞子18重量份地榆 12重量份远志 12重量份柏子仁12重量份玉竹 16重量份沙参 16重量份阿胶 12重量份。
3.如权利要求1或2所述的一种治疗慢性和难治性原发性血小板减少性紫癜的药物，其特征在于，所述的药剂为合剂。
全文摘要
本发明提供了一种治疗慢性和难治性原发性血小板减少性紫癜的药物，是以中草药为原料制成的纯中药药物，它是由当归、枸杞子、地榆、远志、柏子仁、玉竹、沙参、阿胶等为原料按配比制成的药剂，这种药物利用各药的综合作用，对免疫双向调节，对人体无毒无害，口服无异味，服用方便，疗效好，有效率达100％，且无停药反跳现象，费用低廉，疗程短，治愈和恢复血小板计数＞100×10
文档编号A61P7/00GK1565483SQ0311254
公开日2005年1月19日 申请日期2003年6月14日 优先权日2003年6月14日
发明者王开贞, 徐红 申请人:王开贞