2 试剂 2.1 试剂的选择 试剂的质量是确保结果可靠性的先决条件,试剂的选择一方面要根据所用检测的类型,另一方面要根据试验检测目的选择对其敏感的试剂。如APTT试验时所用的活化剂不同,对血内肝素狼疮抗凝物质及因子Ⅷ、Ⅸ缺乏症的敏感性也不同,所以要根据检测项目来选择不同活化剂的APTT试剂,为了试验结果便于比较和估计抗凝剂疗效或指导用药,最好选择INR报告方式,因此,选择试剂应标有ISI值,理论上ISI值越接近1.0越好,ISI值的高低决定INR的精度,也决定了试剂的质量[6]。 2.2 试剂的使用及保存 3 操作的因素 试验操作技术对检验结果有很大的影响,即使很微小的变化也会造成试验结果的明显的变化。 3.1 首先要检查仪器电源、光源是否稳定,预热时间或温度设置是否正确。 3.2 检查所有试剂、缓冲液、标本是否合格,如有问题及时更换。 3.3 每次检测之前,应先检测参比血浆或血浆以确保检测结果的准确性。 3.4 加试剂时要防止气泡产生,无论是透射光还是散射光测定,防止气泡产生是保证结果准确性的前提,有气泡时凝血时间会假性延长。 3.5 在加样过程中除保证样品量的准确外,还应保持加样器与反应杯垂直,加样动作要稳、准、快,既要让感应器充分接触,又不能停顿时间过长。测定过程中应保持反应杯的清洁,防止外异物掉入比色杯。 4 药物与疾病因素 某些药物本身就具有影响凝血机制的功能或是有协同抗凝作用,如水合氯醛、阿司匹林、保泰松、氯贝丁酯、吲哚美辛等可使口服抗凝药物在血液中浓度明显增高。有资料表明[7],大剂量使用青霉素,当血浆青霉素浓度达5000u/ml时PT、APTT明显延长,且随药物浓度的增加而时间延长;头孢哌酮具有甲硫甲唑环的侧链与前凝血酶原相仿;羧酶可错误地与抗生素结合而导致凝血酶原的形成减少,干扰肝脏中VK的代谢,导致低凝血酶血症[8]。肝素、华法林、双香豆素、低分子右旋糖酐等可抑制凝血酶,从而妨碍纤维蛋白原变为纤维蛋白,阻止血小板的粘附和聚集,使血浆中抗凝物质含量增多,影响凝血试验,使凝固时间延长。 除药物对凝血试验结果的影响之外,很多疾病的因素也对结果有很大的影响。如DIC时,由于凝血因子的大量消耗和产生的FDP拮抗凝血酶的作用,使PT延长。但在DIC早期,病人血液处于高凝状态,PT缩短。此时分析血凝结果一定要结合患者病情进展程度。各种疾病导致溶血、黄疸脂血、红细胞含有磷脂,能缩短APTT的值。当HCT>50%时血浆中抗凝剂浓度增高,APTT假性延长;相反,HTC<20%时APTT假性缩短,应适当调整凝剂用量可减少影响。各种原因引起的出血倾向,不能仅依靠血凝分析判断作为诊断指标,因为血凝分析受的影响因素太多太杂,应结合血小板计数、3P试验等共同作为诊断指标。 高血压或急性呼吸窘迫综合征等疾病时,血管因缺氧和硬化发生,肿胀损伤,激活内外凝血途径,导致凝血功能显著增强,继而引起一系列敏感指标的改变[9,10]。 除上述分析的影响因素外,季节变化以及因素等都对凝血实验有影响,如茶叶中的茶多酚,桔汁中的枸橼酸盐,海带中的藻酸双酯钠等都有抗凝作用。 由此可见,血凝试验的结果受多方面因素的影响,只有掌握和了解这些,才能尽可能避免不利因素的干扰和错误的解释,才能真正给临床以帮助。
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